好書推薦!《動物行為實驗指南》電子版pdf,網盤發貨
《動物行為實驗指南》共674頁,涵蓋了常見的實驗動物,如小鼠、大鼠和斑馬魚,詳細描述了每一種行為測試的實驗設計、測試設備、實驗流程、評估指標、預期結果、常見問題及解決方法、數據分析、模型應用與局限性等各個方面。它通過快速引導,幫助研究人員高效地掌握實驗的每個階段,減少了查閱文獻和尋找方法的時間,成為各類科研人員的重要參考資料。 《動物行為實驗指南》共計收錄了16種動物行為類型,包括焦慮抑郁、學習記憶、痛覺、運動、恐懼、社交、癲癇、操作、成癮、視覺、癢覺、味覺、嗅覺、睡眠、斑馬魚行為以及常見動物模型等內容。每一類動物行為下,都詳細介紹了多個經典的實驗范式,涵蓋了超過100種實驗方法。 www.behaviewer.com
大小鼠負重抗阻訓練是一種常用于研究動物運動能力、肌肉功能等方面的實驗方法。研究運動對大小鼠肌肉力量、耐力以及身體機能的影響,通過模擬人類的負重訓練,觀察大小鼠在類似運動模式下的生理和行為變化,有助于深入了解運動適應機制、肌肉生長和代謝調節等生物學過程。
雄性8周齡C57Bl/6小鼠,飼養在溫度為22±1℃、光照-黑暗周期為12小時的環境中。在實驗期間,小鼠可自由獲取水和普通飼料。將這些動物分為兩組:對照組(CON),在整個實驗期間保持靜止狀態;抗阻運動訓練組(RET),在10周內進行抗阻運動訓練。所有動物集中飼養(每籠5只),每周稱重一次。此外,在訓練的第9周測量空腹和進食狀態下的血糖。
小鼠抗阻運動訓練裝置:
為了實施抗阻運動方案,使用了一個帶有鐵制支腳和不銹鋼臺階的梯子。梯子寬5厘米,高105厘米,臺階之間的距離為1厘米,與地面的夾角為80度。因此,動物要進行8至12次的動態運動。梯子頂部有一個休息室(9×9×9厘米),動物在每次攀爬之間可以在里面休息。負重裝置由一個錐形塑料管組成,高約5厘米,直徑2.5厘米,用膠帶固定在動物尾巴的長度方向上。
最大自主負重能力(MVCC)的測定和抗阻運動訓練方案:
首先,讓RET組小鼠熟悉攀爬帶有固定在尾巴近端負重裝置的梯子。在梯子頂部,小鼠到達休息室,并可在攀爬之間休息。為了熟悉運動方案,在每次嘗試攀爬前,小鼠在休息室停留120秒。每天進行三次嘗試,小鼠要攀爬35厘米、55厘米和70厘米,直到到達休息室。通過觸碰小鼠尾巴來鼓勵它們攀爬梯子。該方案連續進行四天。在此期間之后,在訓練項目開始前,測定每只動物的最大自主負重能力(MVCC)。MVCC測定測試開始時,小鼠攀爬時負載為其體重75%的重量,成功完成攀爬后,在負重裝置上增加相當于其體重10%的重量。該過程依次重復(每次攀爬之間休息120秒),直到達到動物無法攀爬完整個梯子的重量。失敗的定義為在連續三次尾巴刺激后仍無法攀爬梯子。成功背負的最高重量被視為小鼠的MVCC。基于MVCC測試,訓練課程包括以四種不同負載進行8次攀爬(每種負載攀爬兩次):負載分別為動物MVCC的50%、75%、90%和100%,每次攀爬之間休息60秒。抗阻訓練每周進行5天,休息2天,為期10周。在此期間,每周(周五)測定一次MVCC,以確定每只動物的合適負載。對照組小鼠在訓練期間一直待在籠子里。這些動物僅在第0周(初始)和第10周(結束)時接觸訓練梯子。在這兩個時間點,對照組小鼠按照上述方法進行適應方案,然后進行MVCC測試。
短期力量訓練
在測定MVCC 48 小時后,開始進行力量訓練方案。訓練包括 20 次攀爬,負荷為 MVCC 的 70%,每組之間的休息間隔為 60-90 秒。完成一組攀爬后,將動物從梯子上取下,在休息的 60 秒內將其放置在單獨的籠子里。動物每周連續訓練 5 天,然后休息 2 天,直到完成 13 次鍛煉。隨后,對小鼠進行丙酮酸耐量測試。24 小時后,動物再進行兩次訓練,總共完成 15 次訓練。
腹腔葡萄糖耐量(ipGTT)和胰島素耐量(ipITT)測試:
在訓練項目的第8周,小鼠在訓練后禁食6小時,進行ipGTT測試。用血糖儀測量空腹血糖水平(時間0)。然后,小鼠腹腔注射葡萄糖劑量為2克/千克,并在15分鐘、30分鐘、60分鐘、90分鐘和120分鐘時測量血糖。兩天后,在訓練后,小鼠禁食6小時進行ipITT測試,并在腹腔注射1單位/千克胰島素前(時間0)以及注射后3分鐘、6分鐘、9分鐘、12分鐘、15分鐘和18分鐘時測量血糖。為了評估血糖衰減速率常數(KITT),將血糖轉換為自然對數數值(Ln)。使用線性回歸(時間×Ln血糖)計算斜率,并通過將結果乘以100得到血糖衰減速率常數(%每分鐘)。
評估指標:
運動能力評估:
通過記錄大小鼠在負重訓練過程中的運動速度、運動距離、運動時間等指標,評估其運動能力的變化。例如,在每次訓練中,使用視頻記錄設備跟蹤動物的運動軌跡,然后通過專業的圖像分析軟件計算出運動速度和距離等參數。
肌肉力量評估:
可以通過一些特定的實驗方法來評估大小鼠的肌肉力量,如握力測試、懸掛測試等。在握力測試中,使用專門的握力計測量大小鼠前肢或后肢的握力;懸掛測試則是觀察大小鼠在懸掛狀態下能夠堅持的時間,以此來反映其肌肉的耐力和力量。
注意事項:
在訓練前、訓練過程中以及訓練后,要密切關注大小鼠的健康狀況,包括飲食、飲水、精神狀態、活動能力等。如發現動物出現異常,如體重下降、食欲不振、行動遲緩或有明顯的外傷等,應立即停止訓練;
抗阻訓練的強度和難度應逐漸增加,避免一開始就給動物施加過大的負荷,導致其受傷或產生應激反應;
在小鼠抗阻運動訓練中,若小鼠不向上爬,可以進行刺激它:用手指或小棍輕輕觸碰小鼠的尾部,這是一種較為溫和的刺激方式,能促使小鼠產生向前移動的反應,通常不會引起小鼠的過度驚恐或不適;輕輕推動小鼠的臀部,給予其一個向前向上的力,模擬自然情況下的驅趕動作,引導它向梯子上方攀爬;在不驚嚇到小鼠的前提下,制造一些輕微的聲音,如輕敲梯子或使用溫和的哨聲,引起小鼠的注意,使其產生不安感,從而激發它向上攀爬以尋找更安全的地方;或者在梯子頂部或沿途放置一些小鼠喜歡的食物,如小塊的巧克力、堅果或特制的鼠糧,利用食物的香味和吸引力,誘導小鼠向上攀爬。
文獻引用:
Bronczek, G.A., Soares, G.M., de Barros, J.F. et al. Resistance exercise training improves glucose homeostasis by enhancing insulin secretion in C57BL/6 mice. Sci Rep 11, 8574 (2021). https://doi.org/10.1038/s41598-021-88105-x
Fluckey, J. D., Kraemer, W. J. & Farrell, P. A. Pancreatic islet insulin secretion is increased after resistance exercise in rats. J. Appl. Physiol. 1985(79), 1100–1105.
Hornberger, T. A. & Farrar, R. P. Physiological hypertrophy of the FHL muscle following 8 weeks of progressive resistance exercise in the rat. Can. J. Appl. Physiol. 29, 16–31.
Pereira, R. M. et al. Short-term strength training reduces gluconeogenesis and NAFLD in obese mice. J. Endocrinol. 241, 59–70. https://doi.org/10.1530/JOE-18-0567 (2019).
Speretta GF, Silva AA, Vendramini RC, Zanesco A, Delbin MA, Menani JV, Bassi M, Colombari E & Colombari DSA 2016 Resistance training prevents the cardiovascular changes caused by high-fat diet. Life Sciences 146 154–162. (https://doi.org/10.1016/j.lfs.2016.01.011)
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