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群游行為是指魚類在群體中協(xié)同游泳的行為，這種行為有助于覓食、逃避捕食者和提高生存率。斑馬魚群游行為的研究可以揭示社交行為、認知功能和神經(jīng)生物學機制。斑馬魚群游測試（Shoaling Test）是一種用于評估斑馬魚社會行為的實驗方法，它基于斑馬魚的天然群居行為。在這種測試中，斑馬魚的群居凝聚力被認為是評估焦慮樣行為的一種指標。這兩種測試方法可以用來評估斑馬魚的社交傾向、焦慮水平以及對新奇物體的反應。

C) 群游測試裝置，測試場地由一個直徑為35.0厘米的白色塑料圓筒組成，水深為5.0厘米。群游測試和群游加新奇物體測試區(qū)域在EthoVision運動追蹤軟件中生成（中心區(qū)、過渡區(qū)和邊緣區(qū)）。D) 群游加新奇物體測試中使用的對象。樂高小人偶，高度為5厘米

群游測試（Shoaling test）：

實驗設(shè)置：斑馬魚被以群體（shoal）的形式放入一個圓形的測試場地。測試場地是一個直徑為35.0厘米的白色塑料圓筒，水深5.0厘米。

測試過程：每組5條魚被放置在測試場地的中心。使用EthoVision軟件，場地被劃分為中心區(qū)域和外圍的過渡區(qū)域及邊緣區(qū)域。

行為記錄：行為被記錄15分鐘，通過測量魚之間的距離（interindividual distance, IID）和最近鄰距離（nearest-neighbour distance, NND）來計算群體密度。

數(shù)據(jù)分析：降低的群體密度被認為是焦慮減少的指標。群體的平均速度是通過計算每條魚的平均速度之和然后除以魚的數(shù)量來得出的。同樣，每條魚的不動狀態(tài)的累積持續(xù)時間的平均值也被計算出來，然后除以魚的總數(shù)，以確定群體的平均不動狀態(tài)。

群游加新奇物體測試（Shoaling plus novel object）：

新奇物體引入：在群游測試記錄15分鐘后，一個新奇物體被放置在測試場地的中心，然后繼續(xù)記錄魚的行為5分鐘。

行為分析：新奇物體的引入同樣通過測量IID和NND來計算群體密度。降低的群體密度同樣被認為是焦慮減少的指標。

新奇物體：新奇物體是一個高度為5厘米的多彩樂高小人偶。

行為記錄：記錄魚在新奇物體存在下探索場地的行為，并通過IID、NND、速度和不動狀態(tài)的時間來分析群游行為。

上海欣軟FishTrack軟件是一款先進的視頻跟蹤軟件，利用深度學習技術(shù)進行身體點檢測，提高了跟蹤精度，廣泛用于動物行為研究，包括群游測試。軟件可以自定義實驗區(qū)域，如中心區(qū)、過渡區(qū)和邊緣區(qū)，這些區(qū)域可以根據(jù)實驗需要進行調(diào)整。FishTrack軟件能夠?qū)崟r跟蹤魚群的運動，通過測量IID和NND來計算群體密度。軟件提供了多種參數(shù)，如速度、移動時間、靜止時間等，可以通過這些參數(shù)來分析魚群的行為。軟件還可以計算魚群的平均速度和平均靜止時間，以便進行群體行為的定量分析。在群游加新奇物體測試中，上海欣軟FishTrack軟件能夠跟蹤魚群對新奇物體的反應，通過測量IID和NND來評估魚群的焦慮水平。

參數(shù)解釋：

實驗組和對照組斑馬魚的群游距離可能有所不同，反映了藥物對群游行為的影響。

• 群游速度：實驗組斑馬魚的群游速度可能加快或減慢，表明藥物對運動能力的影響。

• 群游方向一致性：實驗組斑馬魚的群游方向一致性可能降低，反映了藥物對社交協(xié)調(diào)能力的影響。

• 群體分散度：實驗組斑馬魚的群體分散度可能增加，表明藥物對群體凝聚力的影響。

• 社交互動：實驗組斑馬魚的社交互動頻率和持續(xù)時間可能發(fā)生變化，反映了藥物對社交行為的影響。

• 避光行為：實驗組斑馬魚的避光行為可能改變，反映了藥物對光敏感性的影響。

參考文獻：

• Johnson, A., Loh, E., Verbitsky, R. et al. Examining behavioural test sensitivity and locomotor proxies of anxiety-like behaviour in zebrafish. Sci Rep 13, 3768 (2023).

• Ou, M. et al. Responses of pink salmon to CO2-induced aquatic acidification. Nat. Clim. Chang. 5(10), 950–955.

• Dean, R. et al. Opposing effects of acute and repeated nicotine exposure on boldness in zebrafish. Sci. Rep. https://doi.org/10.1038/s41598-020-65382-6 (2020).