細胞培養不僅是對技術的考驗,更是對耐心活兒和細心活兒。然而,有時候細胞的死亡并非僅僅是技術失誤或設備故障那么簡單 ……
Nature 曾報道過一件「給細胞下毒」事件。密歇根大學綜合癌癥中心的博士生多次遭遇細胞實驗失敗,一次她更換細胞培養基時,細胞瞬間全飄了。博士最后調了監控才發現,原來自己的培養基被同門「下藥」——實驗室里的博士后出于嫉妒,偷偷往她的培養基里倒了酒精。
圖源:Nature 被下藥的培養基
看來細胞的死亡或許有著我們難以想象的原因。從操作失誤到設備故障,再到人為的惡意破壞,細胞的「離奇死法」可能遠比我們想象的要多。今天,我們就來盤點那些細胞的離奇死法 ……
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操作失誤篇
1. 手一抖,雙抗加了 10× 濃度,直接上演「細胞大屠殺」。
現象:培養基中出現大量細胞碎片,細胞形態異常,細胞膜破裂。
原理:雙抗(青霉素和鏈霉素)濃度過高會破壞細胞膜的完整性,干擾細胞的正常代謝過程,導致細胞無法正常吸收營養物質和排出代謝廢物,最終引起細胞死亡。
2. 傳代時吹打太嗨,細胞集體「跳樓自殺」。
現象:細胞從貼壁狀態脫落,細胞膜破裂,細胞內容物外泄。
原理:過度吹打產生的機械剪切力會損傷細胞膜,使細胞失去貼壁依賴性,進而死亡。
3. 周末忘記換液,培養基干成撒哈拉沙漠,細胞變成木乃伊。
現象:細胞逐漸萎縮,細胞膜皺縮,細胞內出現空泡,培養基顏色變深。
原理:培養基中的營養物質耗盡,代謝廢物積累,導致細胞內環境失衡而死亡。
4. 水浴鍋被師弟調成 60℃,解凍后只剩一攤蛋白質濃湯。
現象:細胞解凍后迅速死亡,培養基中出現大量蛋白質凝結物。
原理:高溫會導致蛋白質變性,細胞膜結構破壞,細胞內的酶活性喪失,無法正常代謝,迅速死亡。
5. 把胰酶誤當 PBS 用,細胞當場表演「原地溶解術」。
現象:細胞瞬間從培養皿上脫落,細胞膜溶解,細胞內容物外泄。
原理:胰酶是一種蛋白酶,能夠分解細胞膜上的蛋白質成分,破壞細胞的結構完整性。
6. 師妹凍存時忘了程序降溫,-80℃ 直接液氮,細胞炸成冰碴子。
現象:復蘇后細胞完全死亡,凍存管內細胞呈碎片狀。
原理:細胞凍存需要經過程序降溫,以確保細胞內的水分緩慢結晶,形成較小的冰晶,從而減少對細胞的機械損傷。
7. 給細胞換液時接了個電話,超凈臺紫外線忘關半小時 …
現象:細胞培養基逐漸變黃,細胞膜出現損傷,細胞形態異常,部分細胞死亡。
原理:紫外線具有強烈的殺菌作用,能夠破壞細胞內的 DNA 和蛋白質結構。在超凈臺中,紫外線燈通常用于消毒,但對細胞具有極強的毒性。
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設備刺客篇
8. 超凈臺高效過濾器到期,細胞在「菌菇培養皿」里安詳長毛。
現象:細胞培養液中出現大量細菌或霉菌,細胞表面附著菌絲,培養基變渾濁。
原理:無法有效過濾空氣中的微生物,導致微生物進入細胞培養環境,引起污染,細胞被微生物代謝產物或毒素毒害而死亡。
9. 顯微鏡載物臺卡死,壓碎蓋玻片的瞬間聽見細胞尖叫。
現象:蓋玻片破碎,細胞被壓碎,細胞碎片散落在載物臺上。
原理:載物臺卡死時施加的外力超過了蓋玻片的承受能力,導致蓋玻片破碎,細胞受到機械性破壞而死亡。
10. 液氮罐密封圈老化,復蘇時發現凍存管成了空心冰棍。
現象:凍存管內的細胞復蘇后存活率極低,細胞結構破壞嚴重。
原理:密封圈老化會導致液氮泄漏,凍存管內的溫度無法保持在穩定的低溫狀態,細胞在溫度波動中受到損傷死亡。
11. 移液器校準過期,加的藥量誤差足夠發一篇《nature· 玄學》。
現象:細胞生長狀態不穩定,部分細胞出現異常增殖或死亡。
原理:移液器校準過期會導致加液量不準確,細胞實驗中加入的藥物或試劑濃度過高或過低,導致細胞生長異常或死亡。
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人類迷惑行為篇
12. 自己感冒還硬闖細胞房,三天后細胞集體咳出菌絲。
現象:細胞培養液中出現大量細菌或霉菌,細胞生長緩慢,部分細胞死亡。
原理:感冒時人體攜帶大量病原體,進入細胞房后會污染細胞培養環境,病原體在細胞培養液中繁殖,釋放毒素,導致細胞死亡。
13. 給細胞拍照發朋友圈,結果手機掉進通風櫥 … 細胞被污染
現象:手機掉入通風櫥后,細胞培養液中出現大量細菌,細胞被污染。
原理:手機表面攜帶大量細菌,掉入通風櫥后會污染細胞培養環境,細菌在培養液中繁殖,導致細胞死亡。
14. 文獻說「饑餓處理 12 小時」看成 72 小時,細胞餓到吃自己線粒體
現象:細胞萎縮,細胞內自噬體數量增加,線粒體結構異常,部分細胞死亡。
原理:長時間饑餓會導致細胞內能量供應不足,細胞啟動自噬程序分解自身細胞器以獲取能量,最終因能量耗盡而死亡。
15. 把癌細胞和正常細胞交叉污染,正常細胞連夜長出了偽足逃跑
現象:正常細胞形態異常,出現癌細胞的特征,如快速增殖、失去接觸抑制等。
原理:正常細胞與癌細胞交叉污染后,癌細胞會分泌一些生長因子和細胞因子,誘導正常細胞發生癌變或抑制其正常生長,導致正常細胞死亡。
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耗材背刺篇 & 終極哲學篇
此外還偶爾遇到黑心商家耗材不合格或者究極哲學問題帶來的細胞死亡。
16. 濾膜孔徑實際是標稱值的 3 倍,支原體快樂開 PARTY!
17. 培養基粉末結塊沒發現,細胞在營養荒漠里絕望遷徙。
18. 蓋玻片自帶熒光屬性,共聚焦結果登上《走近科學》!
19. 槍頭沒插住的,移液槍剛拿出來,槍頭就掉進培養基,天女散花!
20. 它活著,但所有實驗結果都不顯著(薛定諤的細胞)?
21. 它死了,但 qPCR 顯示相關基因還在瘋狂表達 ?
22. 永生細胞系為何突然凋亡?顛覆了人類對癌癥的認知 ……
以上問題你遇到過哪些?還有沒有更離奇的細胞死法?快在評論區留言分享吧!
題圖來源:Nature
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