摘要：嵌合抗原受體（CAR）T 細胞療法是癌癥治療領域的突破性免疫療法。為克服當前體外 CAR-T 細胞療法產品的復雜性和高成本問題，近年來開發了在體內直接產生 CAR-T 細胞的替代策略。本文全面概述了體內靶向 T 細胞的 CAR 生成的最新進展，分析了體內 CAR-T 方法面臨的挑戰及潛在應對策略。

一、癌癥治療與 CAR-T 療法概述

癌癥一直是全球性重大健康挑戰，傳統治療方法如手術、放療和化療對晚期或耐藥癌癥效果有限。近年來，免疫療法成為癌癥治療新策略，其中CAR-T 療法通過改造 T 細胞誘導抗腫瘤免疫反應，展現出良好治療前景。該療法可在體外或體內誘導 CAR 在患者 T 細胞中表達，使 T 細胞精準識別并消滅癌細胞。不過，體外 CAR-T 方法在生產過程和成本方面存在顯著問題，限制了其廣泛應用，因此體內 CAR-T 細胞療法的研究愈發受到關注。

二、CAR-T 療法的技術特征

（一）CAR 結構

CAR 是模塊化合成細胞受體，由四個主要區域組成：細胞外結構域負責識別和結合癌細胞，常由單鏈可變片段（scFv）構成，也可包含其他配體或短肽；鉸鏈區連接細胞外和跨膜結構域；跨膜結構域將 CAR 固定在 T 細胞膜上；細胞內結構域包含多種信號轉導組件，如 CD3ζ、CD28 等，負責觸發 T 細胞激活和增殖的細胞內信號轉導。目前，CAR 已發展至五代，各代基于細胞內結構域的不同，具有不同的抗腫瘤能力。

（二）基因編輯工具

多種基因編輯系統用于誘導 CAR 在 T 細胞中的穩定表達，包括轉座子、鋅指核酸酶（ZFNs）、轉錄激活樣效應核酸酶（TALENs）和 CRISPR 系統。這些工具各有優劣，例如轉座子系統成本效益高但存在穩定性和脫靶風險，ZFN 和 TALEN 在基因編輯時面臨技術挑戰，而新興的 CRISPR/Cas9 可實現 T 細胞的精確基因修飾，部分編輯工具適用于體內和體外 CAR-T 細胞的生成 。

三、當前體外 CAR-T 療法的局限性

目前，大多數 CAR-T 細胞通過體外方法生成，該方法包括從血液樣本中采集 T 細胞，進行基因修飾和擴增后回輸到患者體內。此療法雖在血液癌癥治療中取得一定成果，但存在諸多問題：一是可能引發細胞因子釋放綜合征和神經毒性等副作用；二是腫瘤細胞可能產生逃逸機制導致疾病復發；三是使用供體細胞（同種異體）存在移植物排斥風險；四是在實體瘤治療中的療效有限。此外，體外 CAR-T 療法的生產過程復雜耗時，成本高昂，限制了其廣泛可及性。

四、體內 CAR-T 癌癥治療策略

為解決體外 CAR-T 療法的問題，體內 CAR-T 療法應運而生，該方法通過載體將基因編輯工具遞送至患者體內，直接將 T 細胞改造為 CAR-T 細胞。目前，用于體內 CAR-T 生成的遞送系統主要包括病毒載體和納米載體。

（一）遞送系統

病毒載體如慢病毒、逆轉錄病毒和腺相關病毒（AAV），通過修飾可特異性靶向 T 細胞，但存在引發免疫反應等安全隱患。納米載體包括聚合物納米顆粒、脂質納米顆粒和外泌體等，具有低脫靶毒性和可大規模生產等優勢，但也面臨轉染效率低等問題 。

（二）T 細胞靶向遞送進展

在 T 細胞靶向遞送方面，研究人員通過改進病毒載體和納米載體來提高靶向能力。例如，改造后的慢病毒載體可特異性識別并轉染循環 T 細胞，納米載體也能實現對 T 細胞的選擇性靶向，在動物模型中展現出良好的抗腫瘤效果。

（三）產業發展

在產業發展方面，基于病毒載體和納米載體的體內 CAR-T 療法均取得了進展。一些公司開發出新型載體平臺，在動物模型中展現出良好的治療效果，為臨床應用提供了可能。

五、體內 CAR-T 療法發展面臨的挑戰

盡管體內 CAR-T 療法前景可觀，但仍面臨諸多挑戰。一是 CAR 轉基因向靶向 T 細胞的有效遞送困難，病毒載體存在靶向性有限和脫靶風險，納米載體則需要提高穩定性和生物相容性；二是納米載體的轉染效率較低，影響基因表達；三是體內 CAR-T 細胞的持續功能和持久性難以維持；四是在實體瘤治療中，腫瘤微環境的免疫抑制和抗原異質性限制了治療效果；五是臨床前研究中動物模型的臨床相關性不足，影響療法的評估和開發 。

六、體內 CAR-T 療法的監管與審批

體內 CAR-T 產品從臨床前研究走向臨床應用，需要克服監管和轉化障礙。監管機構對病毒和納米載體的質量、安全和有效性有嚴格要求，同時關注基因編輯工具的安全性。在臨床試驗審批過程中，需要確定合適的患者入選標準，提供充分的療效證據，進行長期隨訪，并選擇合適的監管途徑，這些都增加了開發的復雜性和時間成本 。

七、結論

體外 CAR-T 產品雖有一定療效，但復雜的生產過程和高成本限制了其廣泛應用。體內 CAR 療法作為一種可行的替代方案，有望提高安全性和療效，縮短治療等待時間，為患者帶來更多便利。盡管目前仍存在一些問題和挑戰，但隨著研究的不斷深入和行業的持續投入，體內 CAR-T 細胞療法有望在癌癥治療領域取得重大突破，造福更多患者。

識別微信二維碼，添加生物制品圈小編，符合條件者即可加入

生物制品微信群！

請注明：姓名+研究方向！

本公眾號所有轉載文章系出于傳遞更多信息之目的，且明確注明來源和作者，不希望被轉載的媒體或個人可與我們聯系(cbplib@163.com)，我們將立即進行刪除處理。所有文章僅代表作者觀點，不代表本站立場。