大鼠急性軟組織損傷模型

大鼠模型是研究急性軟組織損傷機(jī)制、藥物篩選及治療方法的重要實(shí)驗(yàn)手段，在藥物篩選、康復(fù)方案優(yōu)化及病理機(jī)制研究中具有重要價(jià)值。以下是常用的模型構(gòu)建方法及注意事項(xiàng)：

01

常用建模方法

1.撞擊法

原理：通過外力撞擊模擬人體鈍性暴力損傷。

操作：常用大鼠或家兔作為模型動(dòng)物，使用金屬錘（200-620g）從20-70cm高度自由落下，接觸面積0.8-1cm2，連續(xù)打擊2-6次。例如，300g鐵錘從30cm高度打擊大鼠后腿肌肉，可造成局部挫傷。

（慧均生物制作急性軟組織損傷模型）

優(yōu)勢(shì)：操作簡(jiǎn)便，損傷程度可控，符合臨床挫傷特征。

2. 擠壓法

原理：模擬擠壓傷，通過夾具施加壓力（3-5kg/cm2）持續(xù)5-10分鐘。

應(yīng)用：適用于研究肌肉筋膜層損傷及微循環(huán)障礙。

3. 注射法

操作：向動(dòng)物皮下注射自體血液（如0.15mL大鼠心臟血）或致炎劑（如角叉菜膠），誘導(dǎo)局部血腫或炎癥反應(yīng)。

特點(diǎn)：適用于研究局部水腫和炎癥機(jī)制。

4. 切割法

操作：對(duì)肌肉組織進(jìn)行橫向切割，模擬肌腱或韌帶斷裂，觀察愈合過程。

02

模型評(píng)估指標(biāo)

1.證候評(píng)分

評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：包括皮下瘀血（0-2分）、腫脹程度（0-2分）、活動(dòng)障礙（0-2分）及觸痛反應(yīng)（0-2分），總分越高損傷越嚴(yán)重。

觀察方法：肉眼評(píng)估結(jié)合影像學(xué)（如高頻彩色多普勒超聲）檢測(cè)血流灌注變化。

2.組織病理學(xué)檢查

內(nèi)容：光鏡下觀察肌纖維壞死、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、血管充血及成纖維細(xì)胞增生等病理改變。

評(píng)分系統(tǒng)：如肌纖維腫脹、瘀血、水腫程度分為0-3分。

3.生化指標(biāo)檢測(cè)

炎性因子：檢測(cè)TNF-α、IL-6、IL-1β等促炎因子水平，評(píng)估炎癥反應(yīng)強(qiáng)度。

抗氧化指標(biāo)：如SOD活性、MDA含量，反映氧化應(yīng)激狀態(tài)。

生長(zhǎng)因子：如bFGF、EGF，用于評(píng)估組織修復(fù)能力。

4.血液流變學(xué)

檢測(cè)項(xiàng)目：全血黏度、血漿黏度、血小板聚集率等，評(píng)估微循環(huán)障礙。

03

治療研究與機(jī)制探索

1.中藥制劑

案例：消腫止痛膏可降低NO水平，抑制炎癥反應(yīng)，并促進(jìn)bFGF和EGF釋放，加速組織修復(fù)。

機(jī)制：通過調(diào)節(jié)NF-κB信號(hào)通路抑制促炎因子表達(dá)。

2.物理療法

冷敷與熱敷：急性期冷敷減少滲出，后期熱敷促進(jìn)血液循環(huán)。

激光治療：改善局部微循環(huán)，減輕腫脹和疼痛。

3.基因與分子機(jī)制

AQP-3表達(dá)：急性損傷后骨骼肌中AQP-3表達(dá)變化與水腫和修復(fù)相關(guān)。

NO與SOD：中藥通過調(diào)節(jié)NO濃度和SOD活性，減輕氧化損傷。

04

注意事項(xiàng)與優(yōu)化策略

固定撞擊角度，使用導(dǎo)向管確保落體垂直。

同一實(shí)驗(yàn)員操作，減少人為差異。

軟組織上覆紗布，防止擊打時(shí)造成皮膚破裂。

文獻(xiàn)案例

【文章題目】

酪酸梭菌通過調(diào)控內(nèi)源性硫化氫酶影響小鼠

DSS結(jié)腸炎腸道屏障

【文獻(xiàn)摘要】

目的：探討三七片對(duì)急性軟組織損傷（ASTI）大鼠的治療途徑及作用靶點(diǎn)。

方法：以重物擊打致ASTI的大鼠為研究對(duì)象，經(jīng)三七片干預(yù)后，在不同時(shí)間節(jié)點(diǎn)通過組織損傷評(píng)分、蘇木精-伊紅（HE）染色觀察各組大鼠軟組織病理形態(tài)變化；通過酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)血清中炎癥因子白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、前列腺素E2（PGE2）和環(huán)氧合酶-2（COX-2）的含量，考察三七片對(duì)ASTI大鼠損傷的治療效果；通過蛋白質(zhì)免疫印跡（Western blot）檢測(cè)大鼠軟組織中COX-2和PGE2蛋白質(zhì)表達(dá)水平及COX-2/前列腺素E受體2（EP2）通路相關(guān)蛋白質(zhì)的表達(dá)量，探究三七片治療ASTI大鼠的作用靶點(diǎn)及機(jī)制。

結(jié)果：三七片能有效降低ASTI大鼠血清中的IL-1β和TNF-α含量，抑制炎癥反應(yīng)，起到較好的抗炎作用。對(duì)大鼠血清中COX-2、PGE2的定量檢測(cè)及對(duì)炎癥通路中COX-2、PGE2和EP2表達(dá)的半定量檢測(cè)結(jié)果顯示，三七片能降低大鼠血清中炎癥因子COX-2含量。

結(jié)論：三七片通過降低ASTI模型大鼠血清中IL-1β、TNF-α、COX-2和PGE2的含量，抑制組織中COX-2、PGE2及EP2表達(dá)發(fā)揮抗炎作用。

中醫(yī)藥基礎(chǔ)科研服務(wù)：

相關(guān)咨詢，加微信：1278317307。

【福利時(shí)刻】科研服務(wù)（點(diǎn)擊查看）：、、、、、。咨詢加微信：1278317307。