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動物模型構建與評估︱動物譫妄模型建立與評估

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很多動物行為學實驗測試中,需要使用食物獎勵,相信大家一定遇見過動物不愛吃餌料,導致實驗不能順利開展的情況。今天,我們給大家推薦的餌料品質類比進口的顆粒餌料,歡迎有需要的老師聯系下單!可應用于MED、上海欣軟等廠商提供的標準斯金納箱自給藥箱觸屏實驗箱五孔觸鼻實驗箱迷宮實驗等。

術后譫妄(postoperative delirium,POD)被定義為麻醉和手術后出現的注意力、認知、情緒和精神運動行為急性、短暫、可逆的波動性障礙,是手術患者長期認知能力下降的獨立危險因素,與術后較差的認知結果顯著相關。控制不佳的POD可發展為術后認知功能障礙(perioperative neu-rocognitive disorders,PND)。

譫妄模型:

手術/麻醉方式和動物分組:小鼠隨機分為譫妄組(POD組)和對照組(CON組),每組8只。POD組小鼠異氟烷麻醉下行剖腹探查法。小鼠在丙烯酸室中接受1.4%異氟醚誘導15min,然后將小鼠頭部置于維持面罩中接受1.4%異氟烷和100%氧氣,之后進行簡單的剖腹探查術,從劍突、恥骨聯合上方0.5cm做一正中線切口,暴露腹部臟器2min,5?0vicry/thread逐層縫合,手術時間持續約10min,術畢放回麻醉室共麻醉2h,從麻醉中恢復后,正常提供水和食物。術后每8h給予1次奧布卡因軟膏涂抹傷口,直至所有實驗結束。術后行為學出現異常改變小鼠定義為POD小鼠。CON組小鼠在POD組小鼠麻醉/手術時間段內,置于類似的丙烯酸室中2h,接受100%氧氣,但不進行麻醉/手術操作。

曠場實驗(open field test,OFT)

曠場實驗裝置67cm×67cm×67cm,攝像機位于裝置上方2m處,將小鼠放于九宮格分區的中央區域,開啟VisuTrack軟件采集系統,記錄2min,測試結束后,70%酒精清潔裝置,更換手套。整理實驗數據,統計分析。

Y迷宮實驗

通過Y迷宮實驗評估小鼠的空間識別記憶能力,Y迷宮迷路分辨測試。Y迷宮的3個臂分別為起始臂(S臂)、新異臂(N臂)和其他臂(O臂)。首先進入訓練期,擋住N臂,小鼠由S臂放入,在S臂和O臂中自由活動10min。1h后進入檢測期,即打開N臂,由S臂放入,在3個臂中自由活動5min,采用視頻監測分析系統記錄小鼠在各臂的停留時間和總穿梭次數,計算N臂停留時間比率。

食物埋藏實驗(buried food test,BFT)

每次測試前禁食8h并在測試前1h將小鼠置于測試箱中,測試箱中鋪3cm厚墊料,隨機在0.5cm深處放置一片甜味谷物,測試從將小鼠放于籠子中央開始,記錄小鼠揭開食物并用前爪/牙齒抓咬所用的時間,即小鼠找到食物的潛伏期。若5min內未找到,記錄潛伏期為300s。測試完畢后70%酒精清潔測試箱,更換手套。兩組小鼠均在造模前3d進行3次BFT適應,每次間隔24h,將第3次結果作為基線值,基線值潛伏期仍為300s的小鼠被認為嗅覺或注意力異常,不納入后續實驗。通過埋藏食物實驗檢測小鼠的注意力、有組織的思維以及意識水平。

小鼠神經認知功能檢測方法

分別于術前及術后第1、3、7天采用Morris水迷宮實驗評估小鼠空間學習和記憶能力(代表小鼠神經認知功能)。水迷宮分為NE、NW、SE、SW四個象限,水池溫度控制在22~24℃。該實驗分訓練階段和實驗階段。訓練階段記錄小鼠找到平臺所花費的時間(逃避潛伏期)。實驗階段記錄術前及術后第1、3、7天四個象限的小鼠逃避潛伏期,并取平均值。術后第7天測算完各組小鼠逃避潛伏期后,撤去平臺,選擇平臺對面象限及任一象限釋放小鼠,各象限限時60s,觀察并記錄小鼠在目標象限平臺區域穿越次數,即為平臺穿越次數。

參考文獻:

  • 李可,陸雅媛,陳磊,等.手術/麻醉對老齡術后譫妄小鼠線粒體動力學的影響[J].武漢大學學報(醫學版),2021,42(01):52-56.

  • Dexmedetomidine Mitigated NLRP3-Mediated Neuroinflammation via the Ubiquitin-Autophagy Pathway to Improve Perioperative Neurocognitive Disorder in Mice[J]. Zhang Lieliang;Xiao Fan;Zhang Jing;Wang Xifeng;Ying Jun;Wei Gen;Chen Shoulin;Huang Xiangfei;Yu Wen;Liu Xing;Zheng Qingcui;Xu Guohai;Yu Shuchun;Hua Fuzhou.Frontiers in Pharmacology,2021

  • 李月,楊建新,王彬,等.別孕烯醇酮對老年雄性小鼠術后譫妄的防治作用及其機制[J].山東醫藥,2023,63(30):53-57.

  • Association of postoperative delirium with cognitive outcomes: A meta-analysis[J]. Huang Huawei;Li Haoyi;Zhang Xiaokang;Shi Guangzhi;Xu Ming;Ru Xiaojuan;Chen You;Patel Mayur B.;Ely Eugene Wesley;Lin Song;Zhang Guobin;Zhou Jianxin.Journal of Clinical Anesthesia,2021

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