上海
根據《生化危機》舅舅Dusk Golem，《生化危機9》的主角將是里昂和格蕾絲·阿什克羅夫特（Grace Ashcroft），后者是艾麗莎·阿什克羅夫特（Alyssa Ashcroft）的女兒。
《生化危機9》預告片已確認玩家將扮演FBI技術分析員格蕾絲·阿什克羅夫特，而她的母親就是艾麗莎·阿什克羅夫特，八年前在鷦木旅館遇害。
當下似乎又有一樁接一樁的命案發生在那里，FBI局長命令格蕾絲·阿什克羅夫特前往鷦木旅館現場勘探，直面過去。
預告片中也出現了一個神秘人物，他說格蕾絲·阿什克羅夫特就是他要找的那個“最特別，命中注定的人”：
當有玩家留言稱非常討厭“重返浣熊市”時，Golem回復說：“別擔心，浣熊市并不是《生化危機9》的主設定，僅僅是玩家將去的一個地方。”
浣熊市
艾麗莎·阿什克羅夫特
艾麗莎·阿什克羅夫特（生于1970年）是一位美國調查記者。她曾居住在浣熊市，是少數逃離這座城市的人類之一，并致力于揭露安布雷拉公司及其與浣熊市生物武器的聯系。
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