微生物監測應該遵循什么標準呢？讓我們看看ISO 14698:2003和EN17141:2020。

ISO 14698:2003概述

第1部分：ISO 14698-1:2003概述了潔凈室和相關受控環境中生物污染控制的一般原則和方法。該標準建立了一個評估和控制生物污染的正式系統，確保潔凈室技術有效地監測和減輕污染風險。以下是ISO 14698-1的關鍵要素概述：

ISO 14698第1部分的關鍵原則

危害識別和風險評估

?識別潛在危害：確定可能影響生產過程或產品質量的生物污染源。

?風險評估：評估這些危害發生的可能性，并確定預防或控制措施。

風險區域的指定

?風險區分類：根據污染風險水平對潔凈室內的不同區域進行分類。

?控制措施：實施程序和條件，以消除或減少這些區域內的生物污染機會。

控制限值和監測

?確定控制限值：為每個風險區確定可接受的生物污染水平。

?監測計劃：制定定期監測計劃，以一致地觀察和測量生物污染水平。

糾正措施

?觸發條件：設定條件，一旦滿足，需要立即采取糾正措施。

?糾正程序：實施程序以解決和糾正生物污染事件。

驗證和文件

?驗證程序：建立測試和補充程序，以驗證生物污染控制系統的有效性。

人員培訓

培訓計劃：為潔凈室人員制定和實施培訓計劃，以確保他們了解生物污染控制實踐和程序。

目標

?推廣衛生實踐：確保潔凈室內的所有活動都符合高標準的清潔和衛生。

?最小化污染風險：降低影響生產過程或產品質量的生物污染風險。

?確保合規性：使潔凈室實踐符合國際標準和監管要求。

實施

為了有效實施ISO 14698-1，企業需要建立一個量身定制的正式體系，以滿足其特定的需求和條件。這包括制定適當的監控指南、人員培訓計劃和全面的文檔實踐。最終目標是及時檢測和控制生物污染，確保清潔安全的生產環境。

第2部分：ISO 14698-2:2003為評估和解釋在潔凈室和受控環境中收集的微生物數據的方法提供了指導。這部分標準對于確保生物污染控制措施的有效性以及收集的數據準確反映微生物污染水平至關重要。

ISO 14698第2部分的關鍵原則

微生物數據評估

?目的：提供一種標準化的方法來評估潔凈室的微生物數據。

?方法：描述了估計和解釋活顆粒取樣結果的各種方法。

數據解讀

?指導：就如何解釋微生物數據以評估不同風險區的生物污染水平提供詳細指導。

?應用：確保數據的解釋是一致的，并與ISO 14698-1中概述的控制措施保持一致。

糾正措施和驗證

?觸發條件：定義當生物污染水平超過控制限值時觸發糾正措施的條件。

?核查程序：包括核查生物污染控制措施有效性的程序。

目標

?標準化評估：確保采用一致的方法評估不同潔凈室和受控環境中的微生物數據。

?有效控制：通過為數據評估和解釋提供明確的指導方針，提高生物污染控制措施的有效性。

實施

ISO 14698-2應與ISO 14698-1結合使用，為生物污染控制提供全面的框架。該標準幫助潔凈室操作員實施有效的監測策略，準確解釋微生物數據，并采取適當的糾正措施來維持潔凈室標準

通過遵守ISO 14698-2，組織可以確保其潔凈室環境得到有效監測，生物污染風險降至最低，并保持法規合規性。

有關更多詳細信息，您可以參考官方ISO 14698-2:2003文件和有關生物污染控制標準的相關資源。

“應選擇和執行適當的取樣方法和相關程序，以反映情況的復雜性和多樣性。應使用根據書面程序和設備提供的說明選擇的設備和方法進行取樣

EN 17141標準概述

微生物數據評估

EN 17141:2020是歐洲標準，規定了潔凈室和受控環境中生物污染控制的要求和最佳實踐。本標準取代了舊的EN ISO 14698-1:2003和EN ISO 14698-2:2003標準，為確保各種潔凈室應用中的微生物控制提供了更全面和更新的框架。

EN17141:200的主要原則和要求

生物污染控制系統

?EN 17141強調實施正式的生物污染控制系統。這包括識別和評估污染源、風險管理以及建立監測計劃，以確保對微生物污染的持續控制。

風險評估

?該標準要求進行徹底的風險評估，以確定潛在的生物污染源，評估污染的可能性和影響，并確定適當的控制措施。這有助于根據潔凈室環境的需求和風險量身定制生物污染策略。

環境監測計劃EN 17141概述了制定詳細環境監測計劃的必要性。該計劃應包括：

?監測位置和頻率

?建立警報和行動限制

?記錄和趨勢數據的文件系統

?對參與監測活動的人員進行培訓和教育微生物測量方法

?該標準為選擇適當的微生物測量方法提供了指導，包括體積空氣取樣、表面取樣和培養基選擇。它強調對這些方法的驗證，以確保準確可靠的數據收集。

控制演示

?EN 17141的一個關鍵方面是要求證明生物污染控制系統的有效性。這涉及對微生物數據的定期分析和趨勢分析，對不符合規范的結果進行調查，并保持全面的記錄以支持審計和驗證過程。

持續改進

?該標準提倡對生物污染控制系統進行持續審查和改進。這包括根據新數據、技術進步和潔凈室環境的變化定期更新風險評估、監測計劃和控制措施。

實施

為了符合EN 17141，組織應進行差距分析，以確定當前做法與新標準之間的差異。該過程涉及審查和更新質量管理體系（QMS），以納入EN 17141的要求，確保有效識別和管理所有潛在的污染源。

主要優勢

?加強生物污染控制：通過遵循EN 17141，組織可以確保潔凈室中的微生物控制水平很高，降低污染風險，提高產品安全性和質量。

?監管合規性：遵守此標準有助于組織滿足監管要求，避免不合規風險和潛在處罰。

?改進的風險管理：EN 17141基于風險的方法允許采取有針對性和有效的控制措施，優化資源使用，加強整體潔凈室管理。

選擇最佳采集介質：選擇最佳的微生物培養采集介質是微生物學家的一個常見問題，也是一個經常爭論的話題。根據美國食品藥品監督管理局的規定，用于環境監測的微生物培養基必須經過驗證，能夠檢測真菌（即酵母和霉菌）以及細菌。培養基必須在適當的時間和溫度條件下培養，以確保準確的結果。

（TSA 90mm瓊脂培養基在潔凈室中的廣泛應用示例）

環境監測中使用最廣泛的瓊脂

?胰蛋白胨大豆瓊脂（TSA）：主要用于需氧細菌。

?沙氏葡萄糖瓊脂（SDA）/沙氏麥芽糖瓊脂（SMA）：常用于真菌（酵母和霉菌）。

環境監測的最佳介質

一項研究表明，使用含有1%葡萄糖的TSA并在25°C下孵育5天，可以作為細菌和真菌（包括霉菌和酵母）的通用培養基。該研究得出結論，雖然單獨使用SDA不適合作為通用環境培養基，但含有1%葡萄糖的TSA可以將真菌恢復提高到與SDA相同的水平。這使得TSA與葡萄糖成為一種實用的選擇，特別是在繁忙的制藥應用中，因為它允許使用單一培養基進行全面的環境監測。然而，如果使用的瓊脂發生變化，應進行驗證研究以確保其有效性。

常用瓊脂

至關重要的是，無論使用何種培養基，都應該對其進行驗證，以支持被培養生物體的生長。該驗證確保培養基能夠可靠地檢測和支持目標微生物的生長，提供準確和一致的環境監測結果。通過了解不同培養基的優勢和局限性并確保適當的驗證，微生物學家可以有效地監測和維護潔凈室環境的清潔度。

驗證方案示例

1.生長促進測試：

用10-100CFU的枯草芽孢桿菌、巴西曲霉和其他相關生物接種TSA和SDA平板。

將TSA在30-35°C下孵育3天，將SDA在20-25°C下孵化5天。

將試驗板和對照板上的CFU數量進行比較，以確保至少70%的回收率。

2.無菌檢測：

將未接種TSA和SDA的平板分別在30-35°C和20-25°C下孵育3天和5天。

確保沒有觀察到微生物生長。

3.環境適應性測試：

將TSA和SDA板放置在潔凈室的不同區域。

使用沖擊空氣采樣器對空氣進行采樣。

在指定條件下孵育平板，并評估形成的菌落數量。

通過遵循這些步驟并遵守監管指南，您可以確保潔凈室微生物空氣取樣中使用的瓊脂培養基經過驗證，提供可靠準確的結果。

污染控制策略（CCS）

ISO 14698和EN 17141：

ISO 14698和EN 17141都強調了全面CCS的重要性。該策略涉及識別潛在的污染源，實施控制措施，并持續監測和評估這些措施的有效性。關鍵組成部分包括風險評估、定期監控和文件記錄，以確保持續的合規性和改進

（基于歐盟GMP附件1指南的CCS概述）

應在整個工廠實施CCS，以確定關鍵控制點，并評估所有控制和監測措施的有效性，以管理產品質量和安全風險。應積極審查CCS，必要時進行更新，并推動制造和控制方法的持續改進。其有效性應成為定期管理審查的一部分。CCS中應參考現有的控制系統，并應了解它們的相互作用。

CCS是一份文件化的計劃，概述了控制制造設施污染的所有措施和程序。它是良好生產規范（GMP）指南的關鍵組成部分，特別是對于無菌產品生產。

為什么CCS很重要

CCS的主要目標是確保無菌藥品不受污染，這對患者安全至關重要。通過系統地控制和監測所有潛在的污染源，制造商可以保持高標準的產品質量并遵守監管要求。

在實踐中：

想象一下，一家制藥公司生產無菌注射藥物。他們的CCS將包括：

?詳細的穿衣和洗手程序，以確保人員不會引入污染物。

?使用隔離器或限制進入屏障系統（RABS）保護無菌環境免受人為干預。

?常規空氣和地表采樣，以盡早檢測任何微生物污染。

?為所有在潔凈室工作的員工定期舉辦培訓課程，以加強良好的無菌操作。

總之，CCS就像是在無菌藥品生產中保持清潔和無菌的詳細藍圖，確保患者安全和產品質量的最高標準。

污染源及控制措施常見污染源

?空氣中的顆粒物：灰塵、纖維和其他微觀顆粒。

?人員產生的顆粒：皮膚鱗片、頭發和衣物纖維。

?設備和材料：引入潔凈室的機械和材料。

?暖通空調系統：過濾不足或系統維護不善。

?工藝和清潔程序：制造工藝和無效的清潔方法。

控制措施

?空氣過濾：使用HEPA過濾器去除空氣中的顆粒物。

?滅菌：對設備和材料進行滅菌，以消除微生物。

?限制進入：僅限經過培訓的合格人員進入潔凈室。

?監測和測試：定期進行環境監測，以確保控制措施有效。

（EUGMP附件1:2022關于污染控制策略的聲明）

案例研究：RAC系統實施

RAC系統被集成到制藥潔凈室環境中，以持續監測用于ATMP無菌處理的生物安全柜內的空氣污染物。該系統配置為以1 CFM的速度對空氣進行采樣，確保最佳的沖擊速度和準確的數據收集。

（ATMP無菌加工中BSC柜的環境監測概述）

結果和好處

?提高合規性：該系統符合所有監管要求，包括歐盟GMP附件1。

?增強數據完整性：實時數據收集和記錄確保了準確可靠的監控。

?降低污染風險：持續監測可立即檢測和應對污染事件。

設置和集成

RAC系統被集成到制藥潔凈室環境中，以持續監測用于ATMP無菌處理的生物安全柜內的空氣污染物。該系統配置為以1 CFM的速度對空氣進行采樣，確保最佳的沖擊速度和準確的數據收集。

結論

持續的微生物監測是保持潔凈室環境無菌的一個基本方面。RAC系統具有先進的功能并符合國際標準，為持續的環境監測提供了有效的解決方案。實施ISO 14698和EN 17141中概述的強大CCS對于確保產品質量和患者安全至關重要