科技發(fā)展的齒輪正在高速運(yùn)轉(zhuǎn)，每隔2-3年就會(huì)出現(xiàn)一個(gè)重大的技術(shù)變革引領(lǐng)生命科學(xué)走向更精細(xì)、更微觀、更真實(shí)的水平，這其中也包括蛋白的研究。默克生命科學(xué)作為Duolink技術(shù)的優(yōu)質(zhì)供應(yīng)商，具有品牌知名度、產(chǎn)品質(zhì)量、技術(shù)支持、客戶服務(wù)和創(chuàng)新能力等多方面的優(yōu)勢(shì)。

說起蛋白互作的研究方法，你會(huì)想到什么？

酵母雙雜交，免疫共沉淀和pull-down是最常用的蛋白互作實(shí)驗(yàn)方法。雖然有多種實(shí)驗(yàn)技術(shù)，但研究蛋白互作的科學(xué)家還是會(huì)被三個(gè)問題困擾：

1.實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否能真實(shí)反映勝利水平的蛋白互作情況? 而不是體外條件下產(chǎn)生的假陽性結(jié)果

2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否能檢測(cè)微量的蛋白互作? 無論是微量蛋白樣本還是轉(zhuǎn)瞬即逝的短暫結(jié)合，都極富挑戰(zhàn)

3.這幾種手段的結(jié)果都是不可視的，我們不能看到細(xì)胞層面蛋白互作的分布和強(qiáng)度

是時(shí)候跟上蛋白研究技術(shù)變革的腳步，找到合適的新方法了！這些問題都隨著Duolink? PLA技術(shù)的出現(xiàn)迎刃而解！

Duolink?采用PLA專業(yè)技術(shù)，通過一抗、二抗、DNA滾環(huán)復(fù)制，可將蛋白信號(hào)放大1000倍，實(shí)現(xiàn)單分子級(jí)別的靈敏度。即便是微量樣本、微弱互作、極罕見的低豐度表達(dá)，也能在內(nèi)源水平可視化研究蛋白的互作、定位和定量。更關(guān)鍵的是該技術(shù)操作簡(jiǎn)單，僅需一天！

我們首先需要自己準(zhǔn)備一對(duì)識(shí)別A和B的不同來源的一抗，例如鼠抗A，兔抗B；試劑盒里有一對(duì)二抗探針，這個(gè)探針就是在二抗上加了一段寡核苷酸鏈；還有成鏈寡核苷酸，用于滾環(huán)擴(kuò)增的DNA酶，以及最后產(chǎn)生信號(hào)的熒光探針。

使用Duolink?試劑，無需改造細(xì)胞或蛋白，只要使用抗體即可開展實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)步驟迅速，當(dāng)天即可完成，Duolink?應(yīng)用非常廣泛，堪稱蛋白研究的多面手。至今已在腫瘤學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、免疫學(xué)、病毒學(xué)、表觀遺傳學(xué)、生殖發(fā)育、組織病理學(xué)、心血管、代謝等研究領(lǐng)域進(jìn)行了廣泛報(bào)道。

總結(jié)來說，DuolinkTM技術(shù)主要有以下特點(diǎn)：

1.Duolink?可以讓你對(duì)穩(wěn)定、微弱及瞬時(shí)的內(nèi)源性蛋白質(zhì)相互作用進(jìn)行可視化研究。

2.Duolink?技術(shù)使您能夠在固定的細(xì)胞和組織中，對(duì)內(nèi)源性修飾過程進(jìn)行可視化的研究。

3.使用Duolink?可以讓你對(duì)單個(gè)蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)間相互作用的內(nèi)源表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)。

此外，如需在同一個(gè)樣品中分析多個(gè)蛋白質(zhì)事件，可選用多色multicolor Duolink試劑盒， multicolor最多可在同一個(gè)樣本中檢測(cè)4個(gè)蛋白質(zhì)事件。

單色或多色Duolink?結(jié)果可使用Imagetool軟件進(jìn)行信號(hào)統(tǒng)計(jì)，也可結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行精確定量。結(jié)果真實(shí)可靠，檢測(cè)靈敏方便，技術(shù)新穎又有說服力，簡(jiǎn)直是你發(fā)表文章的利器。