好書推薦！《動物行為實驗指南》電子版pdf，網盤發貨

《動物行為實驗指南》共674頁，涵蓋了常見的實驗動物，如小鼠、大鼠和斑馬魚，詳細描述了每一種行為測試的實驗設計、測試設備、實驗流程、評估指標、預期結果、常見問題及解決方法、數據分析、模型應用與局限性等各個方面。它通過快速引導，幫助研究人員高效地掌握實驗的每個階段，減少了查閱文獻和尋找方法的時間，成為各類科研人員的重要參考資料。 《動物行為實驗指南》共計收錄了16種動物行為類型，包括焦慮抑郁、學習記憶、痛覺、運動、恐懼、社交、癲癇、操作、成癮、視覺、癢覺、味覺、嗅覺、睡眠、斑馬魚行為以及常見動物模型等內容。每一類動物行為下，都詳細介紹了多個經典的實驗范式，涵蓋了超過100種實驗方法。 www.behaviewer.com

單側耳聾（SSD）被定義為一只耳朵出現重度至極重度聽力損失，而另一只耳朵聽力正常或接近正常，且兩耳之間存在顯著的聽力閾值差異。小鼠單側聾造模是一種常用于聽覺研究的實驗方法。

Fig1 動物接受單側耳蝸化學損毀（A）

正常聽力的動物在中腦（IC）活動中表現出對側優勢（B），急性致聾后則出現更為對稱的激活模式（C），而人工耳蝸植入可恢復對側優勢（D）。

藥物法：

利用某些耳毒性藥物破壞小鼠的內耳結構，導致聽力損失。常見的耳毒性藥物如卡那霉素、順鉑等，它們會對耳蝸毛細胞等聽覺相關結構產生損害，從而造成耳聾。

操作方法：以卡那霉素為例，一般采用腹腔注射或皮下注射的方式給藥。通常每日注射一次，劑量根據小鼠體重進行調整，如每天以200 - 400mg/kg的劑量連續注射數天（一般為7 - 14天）。在注射過程中，需密切觀察小鼠的一般狀態，如飲食、活動等情況。

藥物的劑量和注射時間需要嚴格控制，劑量過低可能無法達到理想的造模效果，劑量過高則可能導致小鼠死亡或出現其他嚴重的不良反應。同時，不同品系的小鼠對藥物的敏感性可能存在差異，在正式實驗前可進行預實驗以確定最佳的給藥方案。

噪聲暴露法：

通過讓小鼠暴露于高強度的噪聲環境中，使內耳受到機械性損傷，引起聽力下降。

將小鼠置于專門的噪聲發生裝置中，如隔音箱內的揚聲器附近。噪聲強度一般控制在100 - 120dB（A），每天暴露數小時（如2 - 4小時），連續暴露數天（如5 - 7天）。

噪聲的強度、頻率和暴露時間是影響造模效果的關鍵因素。要確保噪聲環境的穩定性和準確性，避免其他干擾因素。同時，注意觀察小鼠在噪聲暴露過程中的應激反應，如出現過度驚恐或其他異常行為，應及時調整實驗方案。此外，噪聲暴露可能會對實驗人員的聽力造成損害，需做好防護措施。

手術法：

通過手術直接破壞小鼠的單側聽覺器官，如破壞中耳結構或切斷聽神經等，以達到單側聾的目的。

以破壞中耳結構為例，小鼠經麻醉后，在無菌條件下打開外耳道，暴露中耳腔，使用顯微器械小心地破壞聽小骨等中耳結構。術后需對傷口進行縫合，并給予抗生素預防感染。

手術操作需要較高的技術水平和經驗，以確保準確地破壞目標結構，同時避免對周圍組織造成額外的損傷。術后要密切觀察小鼠的恢復情況，包括傷口愈合、耳部有無感染等問題。給予適當的護理和營養支持，促進小鼠的康復。

在大鼠聽力發育開始之前誘發其單側耳聾（SSD）。在出生后第10天，沿著耳后路徑接近鼓室對大鼠進行手術，且不觸碰聽小骨或鼓膜。將具有耳毒性的氨基糖苷類藥物新霉素通過一側的圓窗膜注射到耳蝸內。當這些大鼠長到幼年成年階段時，通過聽覺腦干反應（ABR）來測定它們的聽閾。當某側的聽閾比正常聽力耳的聽閾至少高出95分貝時，就認為單側致聾成功。

在一側耳朵失能的情況下長大，大鼠的耳蝸核（CN）在解剖結構上出現了明顯的不對稱。將來自年齡匹配的正常聽力大鼠大腦的耳蝸核，以及來自單側耳聾大鼠大腦兩側的耳蝸核切成一系列額狀切片，并計算其體積。結果發現，正常聽力大鼠的耳蝸核體積與單側耳聾大鼠對側耳蝸核的體積之間沒有差異。相比之下，致聾側的蝸腹側核出現了生長遲緩的情況，其體積僅為正常聽力側的57%。致聾側的蝸背側核也觀察到了輕微的生長遲緩現象。

模型評估：

聽性腦干反應（ABR）檢測：

這是評估小鼠聽力最常用的方法之一。通過在小鼠頭部放置電極，記錄其對不同頻率和強度聲音刺激的腦干電反應。根據ABR閾值來判斷小鼠的聽力情況，一般認為ABR閾值升高30dB以上可視為造模成功。

Fig2 一只致聾動物典型的聽性腦干反應（ABR）波形圖

致聾一側的正常ABR波形形態消失（圖B），而未處理一側耳朵的聽閾得以保留（圖A）。從一只聽力正常的動物身上記錄到的波形圖則顯示出對稱的聽閾（圖C、圖D）。

耳蝸形態學觀察：

可在實驗結束后，取小鼠的耳蝸組織，進行切片、染色等處理，通過顯微鏡觀察耳蝸毛細胞、螺旋神經節細胞等結構的形態變化。如出現毛細胞缺失、排列紊亂，神經節細胞萎縮等現象，可作為內耳損傷的證據。

注意事項：

在進行小鼠單側聾造模時，應根據實驗目的、研究條件和小鼠的特點選擇合適的造模方法。同時，要嚴格遵循動物實驗的倫理原則，盡量減少小鼠的痛苦，并確保實驗結果的準確性和可靠性。

文章來源：

• Banakis Hartl RM, Greene NT, Benichoux V, Dondzillo A, Brown AD, Tollin DJ. Establishing an Animal Model of Single-Sided Deafness in Chinchilla lanigera. Otolaryngol Head Neck Surg. 2019 Dec;161(6):1004-1011.

• Jakob TF, Rosskothen-Kuhl N, Illing RB. Induction of single-sided deafness in the newborn rat and its consequence for cochlear nucleus volume development. Hear Res. 2016 Mar;333:210-215.