好書推薦!《斑馬魚行為實驗手冊》電子版pdf,網盤發貨
斑馬魚主要在白天活躍,由于壓力直接與抑郁和焦慮相關,下丘腦-垂體-腎上腺(HPA)軸分泌壓力激素皮質醇,并反映壓力反應的程度。由于HPA軸由晝夜節律調節,所有與焦慮/抑郁相關的行為測試最好在下午進行(光照暴露后5-8小時)。有研究表明,焦慮和抑郁都極易受到共病障礙的影響,這幾乎證明了兩種狀態的共存。例如,斑馬魚表現出焦慮和抑郁的僵直行為和活動減少現象在新型水箱測試(NTT)中。建議每只讓每個動物暴露于任務一次。動物的年齡、它們對新環境的熟悉程度以及光照條件可能會影響焦慮/抑郁樣行為實驗的結果。
這類行為分析方法主要包括NTT、群游測試、明/暗水箱測試、聲學驚嚇反應、視頻跟蹤實驗和新物體接近測試。
NTT通常用于評估斑馬魚的焦慮/抑郁樣水平,可用于解釋斑馬魚在焦慮/抑郁條件下活動減少的情況。在NTT中,確定了魚的重心位置,分析總游泳距離和魚在水箱頂部停留的時間應從魚被轉移到水箱后15分鐘開始。此外,焦慮主要通過不規則運動表現,這包括僵直時間和游向底部游動時間的增加。
抑郁的特征是與發育延遲相關的不規則運動,由于游泳距離和速度的減少。盡管NTT在區分焦慮和抑郁樣行為方面有限,并且需要生化水平來準確推斷,但群游測試有效地補償了這一缺陷。群游測試主要基于魚之間的距離進行分析,魚之間的距離增加表明抑郁。
在明-暗水箱測試中,焦慮和抑郁的斑馬魚更可能游向暗水箱,這是由于斑馬魚避免光照環境的先天行為特征。這是一種自然傾向,在黑暗中尋求保護,類似于嚙齒類動物的行為特征。
聲學驚嚇反應用于研究由于抑郁引起的運動遲緩導致的壓力反應速度降低的現象,從感覺功能分析,如對驚嚇聲源的慢反應、低運動速度和避免聲源時的距離減少。此外,聲學驚嚇也可以用來反映對精神分裂癥癥狀的負面反應能力的下降。這種方法主要用于通過刺激不同分貝級的斑馬魚并數字化分析斑馬魚在受驚后的身體角度來描述癥狀的嚴重程度。
在斑馬魚中焦慮的特征是它們的重復行為,視頻跟蹤實驗可以評估6孔板中幼蟲的焦慮相關行為。測試參數表明,焦慮魚的重復行為特征是角速度和轉彎角度的減少。有研究進行了新物體接近測試,測試包括觀察魚對不熟悉物體的接近傾向,這也暴露了魚的焦慮行為跡象。
視頻從試驗場地上方捕捉,單條斑馬魚被放置在試驗場地中,液晶顯示屏位于魚水箱下方,用于視覺條件刺激。電擊用于非條件刺激。紅外LED燈用于幫助捕捉斑馬魚的軌跡。
新水箱由兩個試驗場地組成。一個基線位于水箱中心,將其分為上部和下部試驗場地。視頻從水箱的最大一側捕捉魚的軌跡。
視頻從試驗場地上方捕捉,每次實驗涉及十條斑馬魚,抑郁/焦慮樣的斑馬魚將不愿意縮小魚之間的距離。
視頻從試驗場地上方捕捉,水箱被均勻地劃分為兩個試驗場地。明暗箱的一部分是黑色且不透明的,中間有一個隔板,底部有2厘米的高度供斑馬魚通過。
聲學驚嚇反應視頻從試驗場地上方捕捉,視頻直接連接到計算機進行數據分析。斑馬魚被放入96孔板的每個孔中。在聲學刺激后,幼蟲的尾巴似乎彎曲,顯示出一個彎曲的尾巴。
視頻從試驗場地上方捕捉行為,視頻直接連接到計算機進行數據分析。斑馬魚被放入96孔板的每個孔中。這些行為包括邊緣和向下運動、速度、運動距離、休息頻率、平均休息時間、游泳速度、轉彎角度和斑馬魚之間的距離。
新物體接近測試試驗場地被分為三個部分(內部、過渡和外部);內部放置了一個樂高人(無移動物體),斑馬魚被單獨放置到實驗試驗場地中。
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