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25-羥基維生素D檢測的臨床意義,一文理清!

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維生素 D 是人類必需的一種脂溶性維生素,除發揮調節鈣磷代謝、維持骨健康的功能外,還參與組織細胞的分化、增殖和免疫調節。

人體維生素D主要來源于皮膚經陽光作用合成的維生素D3,另一種來源是食物中(如經光照后的蘑菇、野生海魚等)的維生素D2,兩者通過肝臟代謝后以2種形式存在,分別是25(OH)D2和25(OH)D3。其中25(OH)D3是血液中維生素D的主要存在形式。

維生素D缺乏相關疾病

維生素D缺乏癥主要表現為骨骼疾病,在兒童稱為佝僂病,成人依缺乏程度的不同可引起骨質疏松癥或骨質軟化癥。維生素D缺乏是繼發性甲狀旁腺功能亢進癥的常見病因。提高PTH含量,特別是提高缺乏維生素D的老年人的甲狀旁腺激素含量會導致骨軟化癥、骨轉化增高、骨量降低,并有骨折的危險。25-羥基維生素D含量低還與骨密度低有關。與其他臨床資料結合,檢測結果有助于判定骨代謝

除與骨骼疾病明確相關外,維生素 D也可能與一些疾病有相關性,如癌癥、心血 管疾病、糖尿病、慢性腎臟病和自身免疫性疾病等。

維生素D與癌癥的相關性目前仍存在爭議。實驗室和動物研究表明,維生素D可能通過促進細胞分化和抑制轉移來抑制癌變并減緩腫瘤進展;維生素D可能具有抗炎、免疫調節、促凋亡和抗血管生成作用。

心血管疾病:多項研究表明,維生素 D與高血壓有一定關聯,高血壓患者補充維生素D可減少 心腦血管并發癥的發生。低水平血清25(OH)D3可導致代謝綜合征的發生率升高,出現高脂血癥、胰島素抵抗、高血壓,這些均是心血管疾病發生的高危因素。血清25(OH)D每增加 25 nmol/L(10 μg/L),心血管疾病事件的風險降低 10%。

糖尿病:維生素D對胰島β細胞有一定調節作用,胰島β細胞同樣含有維生素 D 受體,胰島組織同腎臟一樣表達 1?α 羥化酶。大規模隨機臨床試驗顯示,以1 600~4 000 U/d的劑量補充維生素D, 可以控制血糖或降低糖尿病發病率 。糖尿病、腎病患者普遍存在維生素 D 不足,甚至缺乏,補充維生素D或活性維生素D可保護腎功能。但目前對于維生素D補充劑種類和確切劑量還存在爭議。

慢性腎臟病:維生素D缺乏癥在慢性腎臟病患者中普遍存在。維生素D狀態與慢性腎臟病的進展呈負相關,因此慢性腎臟病的診斷和治療指南建議將維生素 D 的水平維 持在 30 μg/L 或更高。

自身免疫疾病:體內維生素D含量水平與類風濕性關節炎的發展發生關系密切,類風濕關節炎發病部位的巨噬細胞、關節軟骨細胞上均有一種特異性的維生素 D 受體表達。具有活性的維生素 D與細胞內的維生素D受體結合,既可以改善人體骨質疏松,又可以作為催化劑促進人體T、B淋巴細胞和樹突狀細胞抑制炎癥細胞因子如白介素?17、干擾素?γ等的合成,促進抗炎細胞因子的分泌,增強類風濕性關節炎患者的免疫調節作用,改善患者的病情。補充維生素D可使自身 免疫性疾病的風險下降22%,長期補充維生素D有助預防自體免疫疾病,尤其對≥50歲人群。

維生素D缺乏的診斷標準

體內可檢測到的維生素D代謝物約有40多種,其中25-羥基維生素D是循環中存在最多的代謝物,可以反映機體維生素D的營養水平。血清25-羥基維生素D水平檢測已被公認為反映維生素D狀態的最合理指標。

下表為國標WS/T 677—2020給出的人群維生素D營養狀況參考判定值。

人群維生素D營養狀況參考值



哪些人群應該進行

維生素D的檢測

影響維生素D水平的因素很多,包括年齡、膚色、季 節、地理緯度、海拔、日照時間、著裝習慣、防曬措施、飲食習慣、空氣污染、肥胖以及影響維生素D代謝的藥物等。

雖然維生素D缺乏或不足在全球人群中非常普遍,但并不主張在人群普遍篩查血維生素D水平,《維生素D及其類似物臨床應用共識》推薦在具有維生素D缺乏風險及需要維持合理維生素D營養狀態的人群中進行血維生素D水平的篩查。

建議篩查血維生素D水平的人群



維生素D檢測的應用

1、權威、詳細而精確的監測體內維生素D的狀態,以便決定飲食或綜合補充,并幫助判斷如何進行補鈣。

2、用于特定的代謝紊亂診斷(骨軟化、佝僂病、肌肉病、維生素D過量、中毒等)

3、用于各種病變群的病理生理學的探究和危險評估(如骨質疏松癥、跌倒、骨折等)

4、 服用維生素D的患者,必須定時進行維生素D水平監測,以隨時調整用藥,避免維生素D中毒。

維生素D缺乏的補充措施

增加日照和富含維生素D的食物的攝入是預防維生素D缺乏/不足的經濟有效的方法。

人體被UVB紫外線照射后可以產生維生素D,經常曬太陽,保證足夠的紫外線照射是有必要的。另外需要注意的是隔著玻璃曬太陽沒有效果,原因是玻璃會阻隔掉幾乎所有的UVB紫外線。涂抹防曬霜也會阻礙皮膚合成維生素D。

維生素D也可通過攝入食物或維生素 D補充品所獲得。包括動物肝臟及瘦肉類、蛋類及魚類、谷物及奶類以及如香菇及魚肝油中也富含維生素D,適量食用可補充維生素D。

口服膳食補充劑來補充維生素D也是一種安全、有效、快捷的方式。

常見食物中維生素D含量

[μg(U)/100 g可食部]



來源《維生素D營養狀況評價及改善專家共識》

25-羥基維生素D檢測方法

國標(WS/T 677—2020)

1.液相色譜串聯質譜法

血清(血漿)中的25(OH)D2和25(OH)D3經甲醇/乙腈沉淀蛋白,采用正己烷萃取,氮氣吹干,用初始流動相復溶,使用液相色譜法分離,串聯質譜多反應監測模式(MRM)檢測,同位素內標法定量,該方法可以分別測定25(OH)D2和25(OH)D3。

該方法具有高靈敏度、高特異性和高精準度等特點。但儀器操作復雜,對檢驗人員的專業度要求高,儀器昂貴,通量低,一般普通的醫院檢驗科無法達到要求。

2.化學發光免疫法

依據化學檢測體系中25(OH)D濃度與體系的化學發光強度在一定條件下呈線性定量關系的原理,利 用儀器對體系化學發光強度的檢測,進而確定25(OH)D含量的分析方法。

由于其操作簡單、快速、無同位素污染且容易實現自動化等優點,具有高靈敏度、干擾因素少、準確度高、能自動化批量操作、可控性強,適用于大規模的25-羥基維生素D營養狀況的監測,但化學發光法需要配備特定的自動免疫分析儀,且只能測出25-羥基維生素D總的濃度。

3.酶聯免疫法

樣本中25(OH)D與其抗體結合,通過洗液除去非結合物,再加入酶標記的抗原或抗體,此時,能固定下來的酶量與樣品中25(OH)D的量相關。通過加入與酶反應的底物顯色后,于特定波長下檢測吸光度, 根據顏色的深淺可以分析樣品中25(OH)D總量。

ELISA法容易實現自動化操作,在節省人力、減少污染方面具有一定的優勢,適合于在常規臨床實驗室開展。但是不能區分25-羥基維生素D2和25-羥基維生素D3,ELISA法基質敏感性,容易與其他非目標化合物發生交叉反應,降低檢測的特異性,且酶促反應的結果受到反應溫度、反應時間及加樣準確性等因素的影響較大。

其他檢測方法還包括放射免疫法、高效液相色譜法 、膠體金免疫層析法、膠乳增強免疫比濁法、均相酶免疫法等。

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