好書推薦！《動物行為實驗指南》電子版pdf，網(wǎng)盤發(fā)貨

《動物行為實驗指南》共674頁，涵蓋了常見的實驗動物，如小鼠、大鼠和斑馬魚，詳細(xì)描述了每一種行為測試的實驗設(shè)計、測試設(shè)備、實驗流程、評估指標(biāo)、預(yù)期結(jié)果、常見問題及解決方法、數(shù)據(jù)分析、模型應(yīng)用與局限性等各個方面。它通過快速引導(dǎo)，幫助研究人員高效地掌握實驗的每個階段，減少了查閱文獻(xiàn)和尋找方法的時間，成為各類科研人員的重要參考資料。 《動物行為實驗指南》共計收錄了16種動物行為類型，包括焦慮抑郁、學(xué)習(xí)記憶、痛覺、運動、恐懼、社交、癲癇、操作、成癮、視覺、癢覺、味覺、嗅覺、睡眠、斑馬魚行為以及常見動物模型等內(nèi)容。每一類動物行為下，都詳細(xì)介紹了多個經(jīng)典的實驗范式，涵蓋了超過100種實驗方法。 www.behaviewer.com

2025年5月17日，韓國保健產(chǎn)業(yè)振興院Gunhyuk Park在Journal of Neuroin-ammation發(fā)表：Rebamipide (Mucosta?), a clinically approved drug, alleviates neuroinfammation and dopaminergic neurodegeneration in a Parkinson’s disease model，揭示了瑞巴派特（Mucosta?）一種臨床批準(zhǔn)的藥物在帕金森病模型中顯示出減輕神經(jīng)炎癥和多巴胺能神經(jīng)元變性的效果。

帕金森病（PD）以多巴胺能神經(jīng)元丟失、神經(jīng)炎癥和運動功能障礙為特征。PD是一種多因素參與的疾病，其中由NLRP3炎性小體激活驅(qū)動的神經(jīng)炎癥在其病理進(jìn)展中起著重要作用。因此，作者旨在評估一種已獲臨床批準(zhǔn)的抗炎藥物瑞巴派特（商品名Mucosta?）通過靶向NLRP3炎性小體在PD中的治療潛力。使用BV2小膠質(zhì)細(xì)胞和1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶（MPTP）誘導(dǎo)的小鼠模型，研究了瑞巴派特對神經(jīng)炎癥、多巴胺能神經(jīng)元保護以及運動功能障礙的影響。研究發(fā)現(xiàn)，瑞巴派特通過抑制NLRP3與NEK7的相互作用，減輕了小膠質(zhì)細(xì)胞的活化及其下游的神經(jīng)炎癥反應(yīng)，從而在MPTP誘導(dǎo)的PD模型中實現(xiàn)了對多巴胺能神經(jīng)元的保護。在MPTP小鼠模型中，瑞巴派特通過干擾炎性小體的激活，顯著下調(diào)了IL-1β水平、小膠質(zhì)細(xì)胞活化和多巴胺能神經(jīng)元的損失。此外，該藥物還保留了紋狀體中的多巴胺水平，并改善了包括運動遲緩和運動協(xié)調(diào)障礙在內(nèi)的運動功能缺陷。在NLRP3基因敲除小鼠中，瑞巴派特的神經(jīng)保護作用被消除，進(jìn)一步驗證了其作用機制依賴于NLRP3。

圖一 瑞巴派特的化學(xué)結(jié)構(gòu)

為了研究瑞巴派特對α-突觸核蛋白和MPP+誘導(dǎo)的小膠質(zhì)BV2細(xì)胞毒性的保護作用，作者進(jìn)行了乳酸脫氫酶（LDH）檢測。結(jié)果顯示，瑞巴派特在50μM濃度下對BV2小膠質(zhì)細(xì)胞具有細(xì)胞毒性，但在0.001–10μM濃度范圍內(nèi)，在處理12小時后未表現(xiàn)出明顯毒性。與對照組相比，α-突觸核蛋白和MPP+的孵育顯著增加了BV2細(xì)胞中LDH的釋放。此外，體內(nèi)實驗顯示，在劑量高達(dá)20mg/kg時，未觀察到多巴胺能神經(jīng)元死亡，表明瑞巴派特在此劑量范圍內(nèi)是安全的。瑞巴派特可顯著抑制由α-突觸核蛋白和MPP+引起的IL-1β和IL-18分泌以及細(xì)胞毒性，但對腫瘤壞死因子（TNF）-α和IL-6水平?jīng)]有顯著影響。瑞巴派特處理可降低NLRP3炎性小體和p20的分泌，并減少前體胱天蛋白酶-1的水平，但對ASC水平無明顯影響。為了進(jìn)一步評估瑞巴派特是否具有抑制NLRP3炎性小體激活的潛力，使用AutoDock Vina和Schr?dinger Maestro進(jìn)行了分子對接分析。分子對接分析結(jié)果顯示，瑞巴派特與NLRP3-NEK7復(fù)合物具有最強的結(jié)合親和力，其次為全長NLRP3和全長ASC。瑞巴派特能夠同時與NLRP3和NEK7形成氫鍵和鹵素相互作用，提示其可能在干擾或穩(wěn)定兩者相互作用方面發(fā)揮作用。隨著瑞巴派特濃度的增加，其與NLRP3和NLRP3-NEK7復(fù)合物的結(jié)合親和力也隨之增強。綜合來看，這些結(jié)果表明瑞巴派特可以直接與NLRP3-NEK7復(fù)合物結(jié)合，支持其作為NLRP3炎性小體調(diào)節(jié)劑的潛在作用。相比之下，瑞巴派特以劑量依賴的方式顯著抑制了由這些NLRP3炎性小體激活劑引起的IL-1β分泌。

圖二 瑞巴派特對MPTP誘導(dǎo)小鼠運動功能障礙的保護作用

為了評估瑞巴派特對MPTP誘導(dǎo)的運動功能改變的影響，作者進(jìn)行了曠場實驗。結(jié)果顯示，在第7天，MPTP顯著減少了小鼠的移動距離，而瑞巴派特治療顯著增加了小鼠的移動距離。此外，還進(jìn)行了轉(zhuǎn)棒實驗以評估瑞巴派特對MPTP引起的運動協(xié)調(diào)障礙和姿勢失衡的影響。與對照組相比，MPTP顯著降低了小鼠在轉(zhuǎn)棒上的停留時間；然而，瑞巴派特治療顯著延長了該時間。還進(jìn)行了爬桿試驗評估瑞巴派特對MPTP誘導(dǎo)的運動遲緩的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，瑞巴派特顯著縮短了轉(zhuǎn)身時間和下桿時間，表明其對運動功能具有改善作用。

圖三 NLRP3基因敲除消除了瑞巴派特在Cas9Ctrl和NLRP3KO小鼠中對 MPTP誘導(dǎo)運動障礙的保護作用

作者利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)構(gòu)建了NLRP3基因敲除（NLRP3KO）小鼠，以進(jìn)一步研究NLRP3炎性小體在瑞巴派特抗PD作用中的機制。結(jié)果顯示，在NLRP3Ctrl小鼠中，MPTP給藥引發(fā)了顯著的神經(jīng)功能損傷，而瑞巴派特治療可明顯改善這些癥狀。相比之下，在NLRP3KO小鼠中，MPTP引起的神經(jīng)毒性較輕，盡管仍有適當(dāng)?shù)纳窠?jīng)損傷表現(xiàn)。此外，在NLRP3KO小鼠中，瑞巴派特治療未顯示出任何治療效果。綜上所述，瑞巴派特通過作用于NLRP3炎性小體發(fā)揮抗炎作用，在MPTP誘導(dǎo)的帕金森病小鼠模型中保護多巴胺能神經(jīng)元，并改善與帕金森病相關(guān)的運動功能障礙。

本研究表明，瑞巴派特在BV2小膠質(zhì)細(xì)胞和MPTP誘導(dǎo)的小鼠帕金森病模型中，通過依賴于NLRP3的機制發(fā)揮了抗炎和神經(jīng)保護作用，提示其在治療由NLRP3驅(qū)動的神經(jīng)退行性疾病中具有潛在應(yīng)用價值。干擾NLRP3與NEK7的相互作用可能成為抑制帕金森病中神經(jīng)炎癥的一個有前景的治療策略。未來的研究應(yīng)進(jìn)一步評估瑞巴派特在多種神經(jīng)退行性疾病模型中的長期安全性、藥代動力學(xué)和治療效果。

文章來源

https://doi.org/10.1186/s12974-025-03461-z