新的研究顯示，在骨髓移植中使用的供體造血干細(xì)胞（HSPCs）上工程表位可以使造血譜系對單克隆抗體或嵌合抗原受體（CAR）T細(xì)胞產(chǎn)生選擇性抵抗，而不改變蛋白質(zhì)調(diào)控或功能。這種策略使得即使這些基因也在HSPCs上表達(dá)，也可以針對白血病存活所必需的基因，從而降低了免疫系統(tǒng)攻擊腫瘤的可能性。這也將改善非基因毒性調(diào)理的安全性，使其能夠治療抵抗性或復(fù)發(fā)性急性髓系白血病。

經(jīng)過同行評議的研究“表位編輯使急性髓系白血病的靶向免疫療法成為可能”來自Pietro Genovese博士的實驗室，他是丹娜法伯/波士頓兒童癌癥和血液疾病中心基因治療項目的主要研究員，也是哈佛醫(yī)學(xué)院的助理教授，該研究于今天在《自然》雜志上發(fā)表。

靶向但脫靶毒性 靶向可有選擇性地抵達(dá)可有選擇性地抵達(dá)可有選擇性地抵達(dá)可有選擇性地抵達(dá)，CAR T細(xì)胞，雙特異性抗體和抗體藥物結(jié)合物是有希望的細(xì)胞免疫療法，可以克服傳統(tǒng)癌癥治療的局限性。然而，可用于安全治療的腫瘤特異性標(biāo)志物的缺乏限制了它們在其他血液惡性腫瘤（如急性髓系白血病）中的應(yīng)用。

由于AML和正常HSPCs或分化的髓系細(xì)胞共享大部分相同的表面標(biāo)志物，靶向雖然脫靶毒性會導(dǎo)致髓系再生不良，使血液難以生成新的血細(xì)胞。由于AML腫瘤的多樣性和靈活性，可能需要靶向多個表面抗原，這可能會導(dǎo)致重疊的毒性。為了降低AML消除的可能性，目前正在開發(fā)各種AML免疫療法，然而它們的使用可能僅限于異基因HSPC移植前的過渡治療。

堿基編輯產(chǎn)生隱形受體 Genovese博士實驗室的博士后研究員Gabriele Casirati醫(yī)生及其同事證明，可以通過改變免疫療法在健康細(xì)胞中識別的表位，安全地靶向存在于正常組織中的腫瘤相關(guān)抗原，賦予選擇性抵抗，并創(chuàng)造僅限于白血病的人工抗原。該研究側(cè)重于三個表位：IL-3受體的α亞單位（IL-3RA; 也稱為CD123），KIT（也稱為CD117）和FMS樣酪氨酸激酶3（FLT3; 也稱為CD135）。這些表位在正常造血發(fā)育的不同階段表達(dá)，在AML病例中超過75％的情況下存在。它們在AML細(xì)胞上的過度表達(dá)與較低的總生存率和HSCT后較高的復(fù)發(fā)率相關(guān)。

Casirati等人使用庫篩選和表位映射來找到阻止治療性單克隆抗體與FLT3、CD123和KIT結(jié)合的氨基酸改變。然后，他們改進(jìn)了一種堿基編輯技術(shù)，將這些改變引入CD34+ HSPCs中，這些細(xì)胞仍然可以植入并在較長時期內(nèi)分化為各種細(xì)胞類型。 HSPCs中的FLT3、CD123和KIT可以進(jìn)行編輯，以防止基因敲除并保持正常蛋白質(zhì)表達(dá)，調(diào)控和細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)。重要的是，這種方法允許靶向一個或多個對白血病生存至關(guān)重要的基因，從而在低的脫靶毒性情況下產(chǎn)生強大的抗白血病效果。

在CAR T細(xì)胞療法之后，Casirati博士及其同事驗證了經(jīng)表位編輯的造血作用的抗性，并且同時消除了來自患者的急性髓系白血病移植物。此外，他們證明了HSPCs的多表位工程的可行性，這可以提高免疫療法對多個靶點的效果，而不會在其他身體部位引起不良反應(yīng)。

在血液惡性腫瘤之外的應(yīng)用 雖然改善AML治療是這項研究的主要目標(biāo)，但復(fù)發(fā)的CD19陽性B細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病和T淋巴細(xì)胞白血病，這些疾病具有有限的安全抗原，也可能從表位工程治療中受益。此外，單克隆抗體、抗體藥物結(jié)合物或雙特異性T細(xì)胞激活劑可以與表位編輯一起使用，逐漸增加體內(nèi)改造的自體細(xì)胞供應(yīng)。

最近提出了使用靶向HSPC特異性標(biāo)志物的免疫療法進(jìn)行非惡性疾病的非基因毒性調(diào)理。經(jīng)表位編輯的HSPCs將增加在這種情況下的HSPC植入，減少再生不良的時間，并消除藥物藥代動力學(xué)所施加的限制。

此外，超過80％的胃腸道間質(zhì)瘤、結(jié)直腸癌、小細(xì)胞肺癌和黑色素瘤與KIT突變有關(guān)。理論上，可以通過自體移植改造的HSPCs使對非血液起源的癌癥進(jìn)行KIT定向治療更加有效。

總之，通過對HSPCs進(jìn)行表位編輯，可以在關(guān)鍵限制因素是靶向但脫靶毒性的情況下，實現(xiàn)更安全、更有效的免疫療法。

編輯：王洪

排版：李麗