好書推薦！《動(dòng)物行為實(shí)驗(yàn)指南》電子版pdf，網(wǎng)盤發(fā)貨

《動(dòng)物行為實(shí)驗(yàn)指南》共674頁(yè)，涵蓋了常見的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，如小鼠、大鼠和斑馬魚，詳細(xì)描述了每一種行為測(cè)試的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、測(cè)試設(shè)備、實(shí)驗(yàn)流程、評(píng)估指標(biāo)、預(yù)期結(jié)果、常見問題及解決方法、數(shù)據(jù)分析、模型應(yīng)用與局限性等各個(gè)方面。它通過快速引導(dǎo)，幫助研究人員高效地掌握實(shí)驗(yàn)的每個(gè)階段，減少了查閱文獻(xiàn)和尋找方法的時(shí)間，成為各類科研人員的重要參考資料。 《動(dòng)物行為實(shí)驗(yàn)指南》共計(jì)收錄了16種動(dòng)物行為類型，包括焦慮抑郁、學(xué)習(xí)記憶、痛覺、運(yùn)動(dòng)、恐懼、社交、癲癇、操作、成癮、視覺、癢覺、味覺、嗅覺、睡眠、斑馬魚行為以及常見動(dòng)物模型等內(nèi)容。每一類動(dòng)物行為下，都詳細(xì)介紹了多個(gè)經(jīng)典的實(shí)驗(yàn)范式，涵蓋了超過100種實(shí)驗(yàn)方法。 www.behaviewer.com

目錄

一、模型概述

二、實(shí)驗(yàn)材料

三、實(shí)驗(yàn)程序

四、數(shù)據(jù)收集和統(tǒng)計(jì)分析

五、模型應(yīng)用

六、方案的優(yōu)缺點(diǎn)

一、模型概述

爬桿測(cè)試是一種廣泛用于評(píng)估嚙齒類動(dòng)物運(yùn)動(dòng)功能障礙的行為測(cè)試。該程序要求小鼠在桿上抓握和操縱以下降到桿底部，可以評(píng)估動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)能力。在測(cè)試期間，將小鼠的頭部朝上放置在桿的頂部，動(dòng)物通常會(huì)自然地向下定向并沿著桿子不間斷地降至地面，以便返回它們的飼養(yǎng)籠。記錄動(dòng)物自動(dòng)轉(zhuǎn)向的潛伏期（Tturn）和下降到桿子底部所需的總時(shí)間（Ttotal）。爬桿實(shí)驗(yàn)最早由Ogawa及其同事設(shè)計(jì)并用于MPTP（多巴胺能的神經(jīng)毒素）處理小鼠（帕金森綜合征小鼠模型）運(yùn)動(dòng)遲緩的研究，結(jié)果表明了使用這些動(dòng)物的爬桿測(cè)試在篩選抗帕金森病藥物方面具有重要價(jià)值。

二、實(shí)驗(yàn)材料

1．實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：爬桿測(cè)試適用于小鼠研究。例如ICR小鼠，C57BL / 6J小鼠等。研究表明該任務(wù)表現(xiàn)沒有性別差異。本范式幾乎不在大鼠中應(yīng)用，因?yàn)樗鼈凅w重更大，在出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)功能障礙后很難執(zhí)行任務(wù)。

注意：

動(dòng)物的年齡，體重以及緊張恐懼程度會(huì)影響任務(wù)的表現(xiàn)。應(yīng)該盡量使動(dòng)物個(gè)體間的差異較小，或者平衡分組。另外要確保動(dòng)物進(jìn)行了充分的環(huán)境適應(yīng)以及與測(cè)試者的適應(yīng)，可以減少動(dòng)物的緊張情緒。

2．測(cè)試爬桿：桿的直徑一般5～10毫米，高45～55厘米。爬桿的頂部裝有一個(gè)木球/橡膠球，以防止小鼠坐在桿頂部不下降至底部。桿表面應(yīng)粗糙，可以用紗布包裹以防止小鼠打滑或者順桿滑下，桿底座可以置于飼養(yǎng)籠中，因?yàn)樾∈罂赡芨矚g下降到熟悉的位置。注意桿和底座的連接要十分穩(wěn)定。目前商品化的測(cè)試桿，其和地面的角度可調(diào)節(jié)（調(diào)節(jié)范圍：0～180°），適用于多種測(cè)試方案。

注意：

實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件的不同而變化，例如桿表面粗糙度、直徑和高度等。建議進(jìn)行文獻(xiàn)檢索，盡量選擇與文獻(xiàn)一致的條件，便于比較實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

3．鋪設(shè)墊料的飼養(yǎng)籠。

4．計(jì)時(shí)器。

5．75%酒精，紙巾等清潔用品。

6．可選配VisuTrack視頻跟蹤系統(tǒng)，可以用于回溯分析（可選，但推薦）。

注意：

小鼠的下降速度較快，對(duì)照組完成任務(wù)用時(shí)通常小于10 s，對(duì)這么短的時(shí)間進(jìn)行人工秒表計(jì)時(shí)，通常會(huì)由于實(shí)驗(yàn)人員的反應(yīng)時(shí)間帶來的一定的誤差。但是通過視頻跟蹤，可以抓取小鼠的重心軌跡，利用軟件自動(dòng)計(jì)時(shí)，可極大減少人工誤差。而且方便記錄小鼠的明顯運(yùn)動(dòng)障礙，失衡或旋轉(zhuǎn)等異常行為表現(xiàn)。

三、實(shí)驗(yàn)程序

1．在正式實(shí)驗(yàn)前，讓動(dòng)物進(jìn)行充分的適應(yīng)，以熟悉實(shí)驗(yàn)環(huán)境和設(shè)備。適當(dāng)?shù)倪m應(yīng)可以幫助減少動(dòng)物的應(yīng)激反應(yīng)，從而提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和穩(wěn)定性。

2．適應(yīng)環(huán)境后，動(dòng)物通常接受3至4天的行為預(yù)訓(xùn)練（3 - 5 min / session / day）。將小鼠頭部朝上放在垂直放置的測(cè)試桿的頂部，正常小鼠會(huì)抓住桿，然后轉(zhuǎn)動(dòng) 180° 使頭朝下并慢慢爬到桿子的底部。如果小鼠在 60 s內(nèi)沒有下降，則進(jìn)行適當(dāng)?shù)囊龑?dǎo)。預(yù)訓(xùn)練的目的是確保所有動(dòng)物一旦被放在桿頂部的球上就會(huì)頭朝下定向并向下爬到桿底部。只有在測(cè)試前試驗(yàn)中表現(xiàn)出Tturn< 8 s和 Ttotal < 18 s的小鼠納入后續(xù)的正式實(shí)驗(yàn)（可以減少個(gè)體差異，使動(dòng)物保持大致相同的基線水平）。剔除異常反應(yīng)的小鼠，比如在桿上反向爬行或者中途停止。

3．預(yù)訓(xùn)練后每只動(dòng)物各進(jìn)行了3次連續(xù)的正式試驗(yàn)，試驗(yàn)間隔為5分鐘。每次試驗(yàn)后清潔爬桿。根據(jù)PD模型的造模情況，不僅適用于急性PD模型，也適用于亞急性PD模型和慢性PD模型的重復(fù)多次測(cè)試。

四、數(shù)據(jù)收集和統(tǒng)計(jì)分析

記錄小鼠旋轉(zhuǎn)180° 向下定向的潛伏期（Tturn）和它下降到桿底部的總時(shí)間（Ttotal）。記錄的最大持續(xù)時(shí)間為120 s。即使小鼠中途下降過程中摔倒，該行為也會(huì)被評(píng)分，直到它到達(dá)地板，Ttotal取為 120 s（默認(rèn)值）。計(jì)算三次試驗(yàn)的平均值以進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。評(píng)分員對(duì)動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)條件并不知情。數(shù)據(jù)以mean ± S.E.M.表示，使用單因素或雙因素方差分析評(píng)估組之間的顯著差異，然后進(jìn)行事后檢驗(yàn)。

五、模型應(yīng)用

1．爬桿測(cè)試可用于定量評(píng)估由MPTP誘導(dǎo)的運(yùn)動(dòng)遲緩，研究帕金森綜合征的病理生理學(xué)，開發(fā)新的抗帕金森病藥物。

2．爬桿測(cè)試不僅在MPTP誘導(dǎo)的帕金森綜合征模型中具有價(jià)值，而且在評(píng)估與精神安定藥相關(guān)的錐體外系副作用方面也有價(jià)值。

3．爬桿測(cè)試可以用于預(yù)測(cè)6-OHDA病變小鼠病變程度，目的是選擇多巴胺能細(xì)胞的感受野去神經(jīng)支配的小鼠。

4．爬桿測(cè)試現(xiàn)在也被廣泛用作評(píng)估與多巴胺能缺陷相關(guān)的運(yùn)動(dòng)障礙的有效模型，以響應(yīng)各種藥物治療，缺血性腦損傷和遺傳操作。

六、方案的優(yōu)缺點(diǎn)

爬桿測(cè)試涉及小鼠前爪抓握的技巧及操控能力水平，需要完整的基底神經(jīng)節(jié)及紅核脊髓通路的參與。可以反映小鼠的動(dòng)作遲緩、前爪無力等現(xiàn)象，并因其對(duì)紋狀體多巴胺損失程度的靈敏性而受到廣泛應(yīng)用。爬桿測(cè)試是相對(duì)簡(jiǎn)單、低成本的運(yùn)動(dòng)功能障礙的測(cè)試，并且具有作為障礙快速篩查方法的價(jià)值。它需要最少的設(shè)備，并提供直接的結(jié)果。考慮到所涉及的訓(xùn)練天數(shù)較短，該過程通常需要大約一周的時(shí)間即可完成。由于它是非侵入性的，它可以隨著時(shí)間的推移而重復(fù)測(cè)試，并且非常適合在多個(gè)時(shí)間點(diǎn)納入慢性操作研究。然而，它們的定量相對(duì)粗糙，難以標(biāo)準(zhǔn)化；并且它們提供的關(guān)于潛在疾病性質(zhì)的信息很少，因?yàn)檫@種運(yùn)動(dòng)功能測(cè)試是非特異性的（攀爬涉及運(yùn)動(dòng)功能的幾個(gè)方面）。可以對(duì)動(dòng)物進(jìn)行一系列的行為和運(yùn)動(dòng)功能測(cè)試，如轉(zhuǎn)棒，步態(tài)測(cè)試，平衡木測(cè)試，以全面了解運(yùn)動(dòng)功能障礙。

參考文獻(xiàn)

[1] BROOKS S P, DUNNETT S B. Tests to assess motor phenotype in mice: a user's guide [J]. Nature Reviews Neuroscience, 2009, 10(7): 519-29.

[2] LUCHTMAN D W, SHAO D, SONG C. Behavior, neurotransmitters and inflammation in three regimens of the MPTP mouse model of Parkinson's disease [J]. Physiology & Behavior, 2009, 98(1): 130-8.

[3] MATSUURA K, KABUTO H, MAKINO H, et al. Pole test is a useful method for evaluating the mouse movement disorder caused by striatal dopamine depletion [J]. Journal of Neuroscience Methods, 1997, 73(1): 45-8.

[4] OGAWA N, HIROSE Y, OHARA S, et al. A simple quantitative bradykinesia test in MPTP-treated mice [J]. Res Commun Chem Pathol Pharmacol, 1985, 50(3): 435-41.

[5] OHNO Y, SHIMIZU S, IMAKI J, et al. Evaluation of the antibradykinetic actions of 5-HT1A agonists using the mouse pole test [J]. Progress in Neuro-Psychopharmacology and Biological Psychiatry, 2008, 32(5): 1302-7.

[6] ZHANG Q S, HENG Y, MOU Z, et al. Reassessment of subacute MPTP-treated mice as animal model of Parkinson's disease [J]. Acta Pharmacol Sin, 2017, 38(10): 1317-28.