2025年溫網女單16強全部產生。衛冕冠軍克雷吉茨科娃在6-2先贏一盤的情況下，被10號種子納瓦羅連扳2盤，最終因體能不支以3-6和4-6輸球。輸掉比賽后，克雷吉茨科娃的賽事9連勝也遭到終結，她直接扶著墻哭泣，難掩心中的苦悶。

由于是連續3場3盤大戰，所以克雷吉茨科娃體能受到了重大考驗，比賽第二盤中段已經開始出現體能瓶頸，決勝盤2-3時，更是叫了醫療暫停，現場測量起了血壓但依然于事無補。打得最后，克雷吉茨科娃明顯的腦子知道怎么打，身體完全跟不上，腳步沉重、移動擊球出現了大量失誤。

反觀納瓦羅第一盤受到下雨暫停的影響，讓她第三局回來后狀態不佳，好在第二盤調整戰術，就和克雷吉茨科娃磨，全場只出現了11個非受迫性失誤。雖然納瓦羅的球攻擊性不夠，缺乏下分能力，但在對手身體不佳的情況下還是抓住了機會。克雷吉茨科娃無緣衛冕后，下周的世界排名將掉到70多位。

納瓦羅下一輪對手是安德列娃，后者以6-1/6-3橫掃巴普蒂斯特，繼23年后再度晉級溫網16強，今年前三個大滿貫都成功進入第二周，也成為繼06年瓦伊迪索娃之后達成這項成就最年輕女將。本賽季，安德列娃的大滿貫戰績10勝2負，成為08年沃茲尼亞奇之后在單賽季拿到10場大滿貫正賽勝利的最年輕的女球員。

另一位前賽會冠軍、11號種子萊巴金娜首盤錯失兩個盤點，以6-7(6)/3-6不敵陶森無緣16強，陶森第二次打進大滿貫第二周。陶森下輪對手是斯瓦泰克，她以6-2/6-3復仇老對手柯林斯，將雙方交手記錄改寫為8-2，第19次打入大滿貫第二周。

其余比賽中，亞歷山德洛娃克服第二盤2-5落后并挽救2個盤點，以6-3/7-6(1)擊敗森梅茲；本西奇在決勝盤克服2-4落后，經過近三個小時的鏖戰以6-4/3-6/7-6(7)險勝科恰雷托；馬內羅以6-1/2-6/6-3擊敗雅斯特雷姆斯卡；薩姆索諾娃以6-2/6-3淘汰16號種子卡薩金娜。

隨著兩位冠軍的出局，本屆溫網16強都沒有問鼎過溫網冠軍，所以25年溫網女單將誕生新的冠軍。值得一提的時，去年的賽會八強也僅剩納瓦羅一人。衛冕冠軍克雷吉茨科娃止步第三輪，亞軍鮑里妮止步第二輪，兩名四強球員維基奇和萊巴金娜分別在第二輪和第三輪被淘汰；闖入八強的奧斯塔彭科和孫璐璐都是一輪游，斯維托麗娜也是止步于第三輪，只有納瓦羅還在簽表當中。