好書(shū)推薦！《動(dòng)物行為實(shí)驗(yàn)指南》電子版pdf，網(wǎng)盤(pán)發(fā)貨

《動(dòng)物行為實(shí)驗(yàn)指南》共674頁(yè)，涵蓋了常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，如小鼠、大鼠和斑馬魚(yú)，詳細(xì)描述了每一種行為測(cè)試的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、測(cè)試設(shè)備、實(shí)驗(yàn)流程、評(píng)估指標(biāo)、預(yù)期結(jié)果、常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法、數(shù)據(jù)分析、模型應(yīng)用與局限性等各個(gè)方面。它通過(guò)快速引導(dǎo)，幫助研究人員高效地掌握實(shí)驗(yàn)的每個(gè)階段，減少了查閱文獻(xiàn)和尋找方法的時(shí)間，成為各類(lèi)科研人員的重要參考資料。 《動(dòng)物行為實(shí)驗(yàn)指南》共計(jì)收錄了16種動(dòng)物行為類(lèi)型，包括焦慮抑郁、學(xué)習(xí)記憶、痛覺(jué)、運(yùn)動(dòng)、恐懼、社交、癲癇、操作、成癮、視覺(jué)、癢覺(jué)、味覺(jué)、嗅覺(jué)、睡眠、斑馬魚(yú)行為以及常見(jiàn)動(dòng)物模型等內(nèi)容。每一類(lèi)動(dòng)物行為下，都詳細(xì)介紹了多個(gè)經(jīng)典的實(shí)驗(yàn)范式，涵蓋了超過(guò)100種實(shí)驗(yàn)方法。 www.behaviewer.com

免疫療法已經(jīng)徹底改變了多種腫瘤類(lèi)型的治療模式，但其潛在的長(zhǎng)期認(rèn)知影響尚未被充分理解。

基于此，2025年5月12日，美國(guó)斯坦福大學(xué)醫(yī)學(xué)院神經(jīng)病學(xué)與神經(jīng)科學(xué)系Michelle Monje研究團(tuán)隊(duì)在Cell雜志發(fā)表了“Immunotherapy-related cognitive impairment after CAR T cell therapy in mice”揭示了CAR T細(xì)胞治療后小鼠出現(xiàn)的免疫治療相關(guān)認(rèn)知障礙。

在本研究中，作者在小鼠模型中發(fā)現(xiàn)，無(wú)論是中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）腫瘤還是非中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌癥的嵌合抗原受體（CAR）T細(xì)胞治療都會(huì)損害認(rèn)知功能并引發(fā)持續(xù)性的中樞神經(jīng)系統(tǒng)免疫反應(yīng)，表現(xiàn)為白質(zhì)中小膠質(zhì)細(xì)胞的反應(yīng)性增強(qiáng)、小膠質(zhì)細(xì)胞趨化因子表達(dá)升高，以及腦脊液（CSF）中細(xì)胞因子和趨化因子水平上升。結(jié)果導(dǎo)致少突膠質(zhì)細(xì)胞穩(wěn)態(tài)失衡以及海馬神經(jīng)發(fā)生受損。還對(duì)接受過(guò)或未接受過(guò)CAR T細(xì)胞治療的腦干腫瘤患者的人類(lèi)額葉組織進(jìn)行了單核測(cè)序分析，結(jié)果證實(shí)治療后的小膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞處于反應(yīng)性狀態(tài)。在小鼠實(shí)驗(yàn)中，短暫清除小膠質(zhì)細(xì)胞或阻斷CCR3趨化因子受體能夠改善CAR T細(xì)胞治療后注意力和短期記憶相關(guān)行為測(cè)試中的少突膠質(zhì)細(xì)胞功能障礙和認(rèn)知表現(xiàn)。綜上所述，這些研究揭示了免疫治療相關(guān)認(rèn)知障礙背后的可干預(yù)的神經(jīng)-免疫機(jī)制。

圖一 腫瘤清除型CAR T細(xì)胞治療后出現(xiàn)的認(rèn)知功能障礙

本研究通過(guò)多種小鼠癌癥模型，包括CNS來(lái)源的DIPG和ALL模型、以及非CNS來(lái)源的兩種骨肉瘤模型和黑色素瘤模型，探討CAR T細(xì)胞治療是否引發(fā)認(rèn)知功能障礙。研究人員使用靶向GD2、CD19或B7H3的CAR T細(xì)胞進(jìn)行腫瘤清除治療并設(shè)置對(duì)照組以排除非靶效應(yīng)和CAR表達(dá)本身的影響。認(rèn)知功能評(píng)估主要通過(guò)新物體識(shí)別測(cè)試（NORT）和T迷宮測(cè)試進(jìn)行，分別檢測(cè)注意力、短期與空間記憶。結(jié)果顯示，接受CAR T治療的DIPG、ALL和侵襲性骨肉瘤小鼠在兩項(xiàng)測(cè)試中均表現(xiàn)出顯著的認(rèn)知損傷，而快速清除型骨肉瘤模型則未出現(xiàn)認(rèn)知障礙。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，后者的免疫反應(yīng)較弱，腦脊液中的炎癥因子如GM-CSF、TNF-α和IL-6水平未明顯升高，提示認(rèn)知損傷可能與CAR T治療引發(fā)的全身性免疫激活有關(guān)而非單純的腫瘤清除過(guò)程。此外，接受氟達(dá)拉濱+環(huán)磷酰胺的小鼠也表現(xiàn)出認(rèn)知功能下降，表明化療本身也可能導(dǎo)致神經(jīng)認(rèn)知副作用。總體而言，本研究表明，CAR T細(xì)胞治療在某些癌癥模型中會(huì)引發(fā)顯著的認(rèn)知功能障礙，其機(jī)制可能涉及神經(jīng)-免疫相互作用，為未來(lái)干預(yù)提供了潛在方向。

圖二 腫瘤清除型CAR T細(xì)胞治療后腦脊液中細(xì)胞因子和趨化因子的持續(xù)升高

為了評(píng)估每種腫瘤模型在接受CAR T細(xì)胞治療后血液和腦脊液中的細(xì)胞因子和趨化因子特征，作者在給予治療性CAR T細(xì)胞或?qū)φ沼玫哪MT細(xì)胞約一個(gè)月后采集了腦脊液并檢測(cè)其中的細(xì)胞因子和趨化因子水平。在DIPG、ALL和侵襲性骨肉瘤模型中，接受腫瘤清除型CAR T細(xì)胞治療一個(gè)月后，腦脊液中的細(xì)胞因子水平顯著高于接受模擬T細(xì)胞治療的荷瘤對(duì)照組；但在快速清除型骨肉瘤模型中未觀察到這種升高。值得注意的是，在DIPG、ALL和侵襲性骨肉瘤模型中，觀察到嗜酸性粒細(xì)胞趨化蛋白（Eotaxin/CCL11）、CCL2、CCL7 和 CXCL10等趨化因子在腦脊液中持續(xù)升高，而這三個(gè)模型也正是之前表現(xiàn)出認(rèn)知功能障礙的模型。隨后，作者還檢測(cè)了在接受標(biāo)準(zhǔn)清淋化療以及模擬T細(xì)胞或靶向CAR T細(xì)胞治療后的免疫健全小鼠黑色素瘤模型中的細(xì)胞因子和趨化因子變化，結(jié)果也發(fā)現(xiàn)CXCL10、CCL7和CCL11在腦脊液中升高。

圖三 趨化因子受體抑制可挽救少突膠質(zhì)細(xì)胞丟失和認(rèn)知行為功能

為了探究小膠質(zhì)細(xì)胞清除的時(shí)間點(diǎn)是否對(duì)挽救少突膠質(zhì)細(xì)胞生成和認(rèn)知功能具有關(guān)鍵作用，作者在不同的CSF1R抑制時(shí)間窗口下重復(fù)了上述實(shí)驗(yàn)并測(cè)試了在一段時(shí)期的小膠質(zhì)細(xì)胞清除后是否允許其恢復(fù)。除了原來(lái)在第14天至第28天接受CSF1R抑制劑（CSF1Ri）治療的小鼠（稱為“晚期CSF1Ri組”）外，還增加了兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組：“早期CSF1Ri+恢復(fù)組”：在CAR T細(xì)胞治療后的第0到第14天給予CSF1Ri（即腫瘤清除階段），隨后在第14到第28天允許小膠質(zhì)細(xì)胞恢復(fù)；“晚期CSF1Ri+恢復(fù)組”：在第14到第28天給予CSF1Ri，之后在第28到第35天允許小膠質(zhì)細(xì)胞恢復(fù)。所有組別的腫瘤清除情況均通過(guò)活體生物發(fā)光成像確認(rèn)，并未受到CSF1Ri的影響。使用CSF1Ri后，小膠質(zhì)細(xì)胞減少了70%–80%，在停藥后恢復(fù)到正常水平。在接受早期或晚期CSF1Ri處理并伴隨小膠質(zhì)細(xì)胞恢復(fù)的各組中，小膠質(zhì)細(xì)胞的反應(yīng)性均有所降低。然而，只有晚期CSF1Ri+恢復(fù)組的小鼠在小膠質(zhì)細(xì)胞恢復(fù)后表現(xiàn)出少突膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量增加，并在新物體識(shí)別測(cè)試中顯示出認(rèn)知功能的改善。進(jìn)一步分析各實(shí)驗(yàn)組腦脊液中的細(xì)胞因子和趨化因子譜發(fā)現(xiàn)，“早期CSF1Ri+恢復(fù)組”腦脊液中趨化因子水平升高，尤其是CCL11；而在那些表現(xiàn)出少突膠質(zhì)細(xì)胞和認(rèn)知功能改善的“晚期CSF1Ri組”（無(wú)論是否恢復(fù)小膠質(zhì)細(xì)胞）中，該因子并未升高。這些結(jié)果進(jìn)一步明確了小膠質(zhì)細(xì)胞清除可能有效的時(shí)間窗口，并再次提示CCL11趨化因子信號(hào)通路可能是干預(yù)認(rèn)知障礙的一個(gè)潛在治療靶點(diǎn)。

全文摘要圖

總結(jié)

以往的研究表明，循環(huán)趨化因子（如CCL11）足以引起海馬區(qū)域的小膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)性和神經(jīng)發(fā)生受損，但更廣泛的神經(jīng)炎癥反應(yīng)機(jī)制仍有待闡明。許多疾病狀態(tài)都表現(xiàn)為注意力、記憶力、信息處理速度和執(zhí)行功能受損的綜合征，它們具有一致的神經(jīng)炎癥特征：白質(zhì)小膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)性增強(qiáng)、多譜系細(xì)胞調(diào)控失衡，破壞神經(jīng)穩(wěn)態(tài)與可塑性，最終導(dǎo)致認(rèn)知障礙。針對(duì)某一疾病情境中認(rèn)知癥狀開(kāi)發(fā)的治療策略，很可能也適用于其他多種疾病。未來(lái)的研究應(yīng)進(jìn)一步探索趨化因子受體抑制在這些其他疾病背景下的治療潛力。

文章來(lái)源

https://doi.org/10.1016/j.cell.2025.03.041