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群游行為是指魚類在群體中協同游泳的行為,這種行為有助于覓食、逃避捕食者和提高生存率。斑馬魚群游行為的研究可以揭示社交行為、認知功能和神經生物學機制。斑馬魚群游測試(Shoaling Test)是一種用于評估斑馬魚社會行為的實驗方法,它基于斑馬魚的天然群居行為。在這種測試中,斑馬魚的群居凝聚力被認為是評估焦慮樣行為的一種指標。這兩種測試方法可以用來評估斑馬魚的社交傾向、焦慮水平以及對新奇物體的反應。
C) 群游測試裝置,測試場地由一個直徑為35.0厘米的白色塑料圓筒組成,水深為5.0厘米。群游測試和群游加新奇物體測試區域在EthoVision運動追蹤軟件中生成(中心區、過渡區和邊緣區)。D) 群游加新奇物體測試中使用的對象。樂高小人偶,高度為5厘米
群游測試(Shoaling test):
實驗設置:斑馬魚被以群體(shoal)的形式放入一個圓形的測試場地。測試場地是一個直徑為35.0厘米的白色塑料圓筒,水深5.0厘米。
測試過程:每組5條魚被放置在測試場地的中心。使用EthoVision軟件,場地被劃分為中心區域和外圍的過渡區域及邊緣區域。
行為記錄:行為被記錄15分鐘,通過測量魚之間的距離(interindividual distance, IID)和最近鄰距離(nearest-neighbour distance, NND)來計算群體密度。
數據分析:降低的群體密度被認為是焦慮減少的指標。群體的平均速度是通過計算每條魚的平均速度之和然后除以魚的數量來得出的。同樣,每條魚的不動狀態的累積持續時間的平均值也被計算出來,然后除以魚的總數,以確定群體的平均不動狀態。
群游加新奇物體測試(Shoaling plus novel object):
新奇物體引入:在群游測試記錄15分鐘后,一個新奇物體被放置在測試場地的中心,然后繼續記錄魚的行為5分鐘。
行為分析:新奇物體的引入同樣通過測量IID和NND來計算群體密度。降低的群體密度同樣被認為是焦慮減少的指標。
新奇物體:新奇物體是一個高度為5厘米的多彩樂高小人偶。
行為記錄:記錄魚在新奇物體存在下探索場地的行為,并通過IID、NND、速度和不動狀態的時間來分析群游行為。
上海欣軟FishTrack軟件是一款先進的視頻跟蹤軟件,利用深度學習技術進行身體點檢測,提高了跟蹤精度,廣泛用于動物行為研究,包括群游測試。軟件可以自定義實驗區域,如中心區、過渡區和邊緣區,這些區域可以根據實驗需要進行調整。FishTrack軟件能夠實時跟蹤魚群的運動,通過測量IID和NND來計算群體密度。軟件提供了多種參數,如速度、移動時間、靜止時間等,可以通過這些參數來分析魚群的行為。軟件還可以計算魚群的平均速度和平均靜止時間,以便進行群體行為的定量分析。在群游加新奇物體測試中,上海欣軟FishTrack軟件能夠跟蹤魚群對新奇物體的反應,通過測量IID和NND來評估魚群的焦慮水平。
參數解釋:
實驗組和對照組斑馬魚的群游距離可能有所不同,反映了藥物對群游行為的影響。
群游速度:實驗組斑馬魚的群游速度可能加快或減慢,表明藥物對運動能力的影響。
群游方向一致性:實驗組斑馬魚的群游方向一致性可能降低,反映了藥物對社交協調能力的影響。
群體分散度:實驗組斑馬魚的群體分散度可能增加,表明藥物對群體凝聚力的影響。
社交互動:實驗組斑馬魚的社交互動頻率和持續時間可能發生變化,反映了藥物對社交行為的影響。
避光行為:實驗組斑馬魚的避光行為可能改變,反映了藥物對光敏感性的影響。
參考文獻:
Johnson, A., Loh, E., Verbitsky, R. et al. Examining behavioural test sensitivity and locomotor proxies of anxiety-like behaviour in zebrafish. Sci Rep 13, 3768 (2023).
Ou, M. et al. Responses of pink salmon to CO2-induced aquatic acidification. Nat. Clim. Chang. 5(10), 950–955.
Dean, R. et al. Opposing effects of acute and repeated nicotine exposure on boldness in zebrafish. Sci. Rep. https://doi.org/10.1038/s41598-020-65382-6 (2020).
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