腦聲小店基于深度科研洞察，專注為動物實驗提供"簡器械·精實驗"解決方案。我們突破高精設備局限，開發手工定制化儀器及配件，通過科研巧思將基礎工具轉化為創新實驗方案。產品涵蓋行為學裝置、操作輔助工具等，使實驗室在保持操作簡效的同時，實現精細化數據采集，助力科研人員以創造性思維發掘簡易儀器的潛在科研價值。

將斑馬魚幼魚放入裝有1毫升E3培養液的10毫升或20毫升注射器中，然后封住注射器。注射器放置在以下兩種裝置中：（1）一個安裝在支撐桿和支架上的三爪夾；或者（2）一個更堅固的泡沫塊，在其中心鉆有一個與注射器大小匹配的孔，該泡沫塊由標準瑜伽泡沫塊（尺寸為23×15×7.6厘米）制成。安裝好后，將注射器的活塞置于一個由卷紙制成的導管下方，導管的周長略大于所使用的最大砝碼（對于標準的38毫米校準砝碼，導管直徑為40毫米；導管高度分別為27厘米、54厘米或108厘米）。將一個砝碼（例如天平校準砝碼）放入導管中，撞擊時會產生壓力波。在每次放下砝碼的間隔期間，打開注射器的塞子以去除氣泡，并將幼魚重新放置回注射器筒內，且每次放下砝碼的間隔時間小于10分鐘。

斑馬魚幼魚創傷性腦損傷（TBI）模型

用于產生爆炸壓力波并引發創傷性腦損傷。將一個砝碼 dropped到裝有數十條處于培養液中的斑馬魚幼魚的注射器活塞上。當砝碼落下撞擊活塞時，活塞會被下壓，這就會通過液體培養液進而通過斑馬魚幼魚傳遞一個壓力波。能夠施加不同程度的損傷劑量：（A）所拋下砝碼的質量；（B）砝碼下落的高度；（C）容納斑馬魚幼魚群體的注射器的大小（容積）；（D）注射器固定裝置的剛度，其中注射器夾式固定器的夾臂會產生移動，在受到撞擊時會消散壓力，而泡沫塊式注射器固定器在砝碼撞擊時會阻止注射器移動。

創傷后（PTS）癲癇發作的行為檢測

為了測量創傷后癲癇發作情況，對受精后6天（dpf）的斑馬魚幼魚進行創傷性腦損傷處理。選擇6天齡的幼魚是因為到這個年齡時它們的中樞神經系統已經發育良好，幼魚對操作具有較強的耐受性，但其他年齡的幼魚對于其他研究人員可能也有用。然后，將幼魚放入裝有200微升E3培養液的96孔板中，并在創傷性腦損傷后45分鐘，使用行為學軟件記錄30分鐘。

癲癇發作的人工評分

為了排除在更高損傷強度下幼魚不活動所帶來的干擾影響，對癲癇發作情況進行了人工評估。對幼魚施加不同程度的創傷性腦損傷，然后記錄2小時。將高活動發作閾值設定為未受傷組中檢測到的最高最大活動運動量的64%。這個閾值可以檢測到異常高的活動發作以及發作的時間。然后，由不知情的觀察者對這些高活動發作的時間點進行評分，以判斷是否存在癲癇發作的特征。斑馬魚幼魚的癲癇發作分為三個階段，其中I期癲癇發作表現為活動增加，II期癲癇發作表現為漩渦狀運動，III期癲癇發作表現為陣攣性癲癇發作，并伴有姿勢喪失（LOP）和下沉現象。在這里，I期癲癇發作被評分為明顯的過度活躍運動，伴有輕微的抽搐行為和輕微的姿勢喪失（姿勢喪失時間小于1秒，幼魚仍在活動）。II/III期癲癇發作被評分為漩渦狀運動、陣攣性癲癇發作事件以及姿勢喪失（完全側臥且不活動時間大于1秒）。在孔板中漂浮且不表現出任何運動的幼魚被視為死亡，并從數據中剔除。

斑馬魚幼魚鰭部刺激反應

為了進一步評估創傷性腦損傷后幼魚的不活動情況，在創傷性腦損傷后使用鰭部刺激反應檢測方法來評估幼魚對刺激的反應。這種檢測方法用于測量斑馬魚在麻醉后意識喪失的情況。將6天齡的幼魚以不同的創傷性腦損傷強度進行損傷處理，然后按組放入10毫升培養皿中。用尖銳的金屬點戳幼魚的尾鰭一次，并在30分鐘內每5分鐘觀察一次反應（觀察者不知情）。有反應的幼魚會立即游開，而無反應的幼魚則不會做出反應。在量化后評估幼魚的心跳，以確保數據中不包含死亡的幼魚。

參考文獻：

• Locskai LF, Gill T, Tan SAW, Burton AH, Alyenbaawi H, Burton EA, Allison WT. A larval zebrafish model of traumatic brain injury: optimizing the dose of neurotrauma for discovery of treatments and aetiology. Biol Open. 2025 Feb 15;14(2):bio060601.