為什么要做外泌體大規(guī)模提??？

1）節(jié)省成本：Umibio大規(guī)模提取，同比試劑盒等方法提取節(jié)省人力成本，物力成本等50%以上，而且體積越大，成本優(yōu)勢(shì)越高；

2）提高效率：傳統(tǒng)方法每個(gè)批次一般不會(huì)超過(guò)300ml，而大規(guī)模提取可以達(dá)數(shù)十升，一天內(nèi)完成，以10L為例，時(shí)間可以壓縮90%，甚至更多；

3）方便質(zhì)控：每個(gè)批次通過(guò)連續(xù)進(jìn)樣，最終出來(lái)的成品，通過(guò)一次的提取，不用擔(dān)心每個(gè)批次提取的差異過(guò)大，數(shù)據(jù)更穩(wěn)定，有說(shuō)服力；

4）純度飛躍：通過(guò)大規(guī)模提取工藝，可以大量的去除雜質(zhì)，優(yōu)化后純度遠(yuǎn)遠(yuǎn)比常規(guī)試劑盒提取高，更好的保留外泌體的活性和形態(tài)；

大規(guī)模提取是有參考的解決方案的，這兩篇文獻(xiàn)很好的做了闡釋。

外泌體大規(guī)模提取關(guān)鍵步驟[1]：

● 收集條件培養(yǎng)基（CM）：收集神經(jīng)母細(xì)胞瘤 N2a 和成肌細(xì)胞 C2C12 的培養(yǎng)基，經(jīng)過(guò)低速離心和 0.22 μm 過(guò)濾去除大顆粒和細(xì)胞碎片。

● 處理大體積培養(yǎng)基：對(duì)于大體積培養(yǎng)基（50 ml 至 200 mL），使用切向流過(guò)濾（TFF）系統(tǒng)進(jìn)行濃縮和透析，然后加載到結(jié)合-洗脫分子篩層析（BE-SEC）柱上進(jìn)行純化。

● 分離 EVs：根據(jù) 280 nm 紫外吸收色譜圖收集外泌體樣品，濃縮后儲(chǔ)存用于下游分析。

規(guī)模：

該方法能夠從較大體積的培養(yǎng)基中純化外泌體，通過(guò)使用不同濾膜（100 kDa 和 300 kDa）的 TFF 系統(tǒng)進(jìn)行濃縮和透析，然后通過(guò) BE L-SEC 柱凈化，可保留大部分囊泡并提高純度，適用于大規(guī)模外泌體純化。

外泌體大規(guī)模提取關(guān)鍵步驟[2]：

● 制備培養(yǎng)上清液：從小鼠脾細(xì)胞中獲得小鼠 CTLs（CD8+T 細(xì)胞）和 T 輔助細(xì)胞（CD4+T 細(xì)胞），培養(yǎng)人 PBMCs、NK-92 細(xì)胞、Jurkat 6E-1 細(xì)胞和非貼壁 HEK293.2sus 細(xì)胞，收集培養(yǎng)上清液并過(guò)濾去除細(xì)胞和碎片。

● 超濾：使用 TFF 系統(tǒng)和 mPES MidiKros Filter Modules 對(duì)培養(yǎng)上清液進(jìn)行超濾，濃縮并替換為 PBS。

● 陰離子交換柱色譜：將超濾濃縮的 EVs 加載到陰離子交換柱上，用 NaCl 線性梯度（0.15 M 至 0.8 M）或分步方法（0.3 M 和 0.5 M NaCl）洗脫，收集不同鹽濃度下的洗脫組分。

規(guī)模：

通過(guò)該方法可從 4 L 培養(yǎng)上清液中制備外泌體，且能夠有效分離生物活性外泌體和微泡樣的外泌體，適用于大規(guī)模制備。

大規(guī)模提取有沒(méi)有難度？

1）從基本操作上沒(méi)有難度，每一步按部就班即可；

2）從經(jīng)驗(yàn)和提取摸索角度，需要有大量的操作經(jīng)驗(yàn)作為支持；

外泌體大規(guī)模提取全流程是什么樣子的？

1） 樣本準(zhǔn)備；

2） 樣本預(yù)處理；

3） 連續(xù)進(jìn)樣濃縮；

4）提取純化；

5）抽樣檢測(cè)質(zhì)控；

6）無(wú)菌分裝；

外泌體大規(guī)模提取外泌體產(chǎn)品應(yīng)用：

1）腫瘤治療：外泌體作為藥物載體：科學(xué)家們正在設(shè)計(jì)工程化外泌體，通過(guò)工程化賦能，外泌體可以實(shí)現(xiàn)更高效、更安全的藥物遞送。

2）外泌體作為生物標(biāo)志物：外泌體攜帶的內(nèi)容物能夠反映親本細(xì)胞的生理病理特征，因此具有作為癌癥早期診斷標(biāo)志物的潛力。

3）免疫調(diào)節(jié)：外泌體在自身免疫性疾病中的應(yīng)用：間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體（MSC-Exos）顯示出強(qiáng)大的免疫調(diào)節(jié)和抗炎作用。

4）組織修復(fù)與再生：外泌體在組織修復(fù)中的作用：外泌體通過(guò)傳遞生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子等活性物質(zhì)，促進(jìn)細(xì)胞增殖、分化和血管生成，從而在組織修復(fù)和再生中發(fā)揮重要作用。

5）工程化外泌體：為了提高外泌體的精準(zhǔn)靶向遞送和載藥物能力，科學(xué)家們正在開(kāi)發(fā)工程化外泌體。這些工程化外泌體通過(guò)基因編輯、表面修飾等手段，實(shí)現(xiàn)對(duì)外泌體功能和特性的精確調(diào)控。

Umibio目前有哪些服務(wù)與產(chǎn)品？

1）大規(guī)模提取服務(wù)：根據(jù)量的大小，執(zhí)行梯度價(jià)格，幫您節(jié)省成本，快速獲取外泌體；

2）人源外泌體：MSC，NK等細(xì)胞外泌體；

3）動(dòng)物源外泌體：牛奶外泌體；

4）植物源外泌體：葡萄外泌體，姜黃外泌體；