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養死了多少細胞,才能總結出這么狠的干貨!

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都說養細胞等于養了個「孩子」,從此以后你的衣食住行、生活起居中都夾帶著看「孩子」、給「孩子」喂飯、管理「孩子」的社交等雜事瑣事。

然而這個科研界的「好大兒」實驗,卻異常矯情,能讓科研人磨礪出其他實驗帶不來的美德。

  • 孝順:細胞在不遠游,讓你體驗一下母慈子孝的感覺。

  • 堅持:一次培養至少要花上兩周,讓你磨礪心性、成就大我

  • 創新:只要有創意和勇氣,你的培養皿里就能出現任意污染源

  • 穩重:實驗室發了 50 篇 SCI 的細胞被我親手養死了

  • 勇敢:因用錯細胞系,導致課題組被瘋狂撤稿

一次細胞培養至少小半個月,長的話可能要耗費 2 個月,從復蘇到傳代再到換液、分化,都需要小心翼翼。

有時候多看一眼它們,可能都會導致細胞「交友不慎」,陷入污染....... 為此,學霸君為大家整理了 5 個「壞孩子」污染源頭的原因以及識別方式。

文末還附上了科研人細胞培養專項訓練,一周跟練,讓你的細胞得到一致的品控。

細菌污染:顯微鏡下的 「小點點」

細菌污染會在培養基中形成微小的沉淀物,這些「小點」在顯微鏡下清晰可見。

此外,培養基的變色、渾濁度的提升、細胞形態的突變,以及細胞生長速度的減緩,都是細菌污染的直接體現。

細菌污染的形態特征如下:


圖源:小紅書博主


圖源:自制

細菌污染主要因為實驗人員在細胞培養過程中未能嚴格遵守無菌操作規程。

如未能正確消毒或穿戴適當的個人防護裝備,導致細菌通過皮膚、毛發或呼吸帶入培養環境中。

此外,實驗室環境若未定期清潔消毒,或使用的培養基和試劑本身存在污染,也易引發細菌污染。

真菌污染:培養基上的 「細絲線」

真菌污染會在培養基表面形成絲狀或絮狀物,這些「絲線」 是真菌生長的明顯標志。


圖源:小紅書博主


圖源:自制

真菌污染往往與實驗室環境的濕度和通風條件有關,高濕度環境有利于真菌孢子的生長和繁殖。

使用受污染的培養基或血清,或實驗器材未經過嚴格的消毒程序,也可能成為真菌污染的來源。

支原體污染:看不見的 「隱形者」

支原體污染難以通過光學顯微鏡觀察,但它們會讓細胞生長速度減慢,需要通過 PCR 等分子生物學方法來檢測。

如果你發現以下征兆,又看不出明顯的培養基變化,則可能為支原體污染。


圖源:自制

支原體污染的一個主要原因是其體積微小,能夠穿透常規的過濾膜,因此,在細胞培養過程中難以通過過濾手段去除。

病毒污染:細胞的惡性「病變」

病毒污染會導致細胞出現異常的細胞病理效應,如細胞融合或形成合胞體,這些變化在顯微鏡下容易識別。


圖源:自制

病毒污染通常因為細胞培養物與受污染的生物材料接觸,如使用未經充分篩選或驗證的血清、血漿或細胞系,這些材料可能攜帶病毒或病毒核酸。

此外,實驗室人員在操作過程中未能遵循嚴格的無菌技術,或實驗室環境中存在病毒污染源。如受污染的設備或工作臺面,也可能導致病毒污染。

細胞交叉污染:發生形態的「異變」

細胞交叉污染會讓細胞形態發生改變,如細胞變大或變小,這些「異變」 在顯微鏡下可以觀察到。


圖源:小紅書博主


圖源:自制

交叉污染往往發生在細胞培養操作中,由于不同細胞系或株之間的直接接觸,或使用未經徹底消毒的共享設備和耗材。

此外,實驗室人員在處理多個細胞培養物時未更換手套或工具,或在不同細胞培養間未采取適當的隔離措施,都可能引起交叉污染。

交叉污染還可能源于細胞培養物的誤標記或混淆導致不準確的細胞系識別和使用。

這讓珍貴細胞系「掉價」,便宜細胞系「鳩占鵲巢」,最后,讓實驗結果統統無效,結果要多慘痛就有多慘痛!

最后,環境因素如灰塵、不潔的設備等也可能導致細胞污染,需要大家保持實驗室的清潔和無菌,給孩子打造一個良好的生存環境。

科研人細胞培養專項訓練!

學霸君為科研人員準備了一份細胞培養專項訓練計劃,一周跟練,讓你的細胞培養技藝更上一層樓,確保細胞得到一致的品控~

一周訓練內容如下:


圖源:自制

通過本文的介紹,學霸君希望你能對細胞培養有更深的了解,掌握污染的識別與處理方法,讓你的「好大兒」培養之路更加順暢。

記住,每一盤優質的細胞背后,都有一個細心呵護細胞的科研爸媽。

題圖來源:圖蟲創意

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