文/華中農業大學陳昌福，武漢科研時代生物技術有限公司 周鑫軍

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陳昌福有話說

大口黑鱸的養殖面積正在我國各地快速地擴大，各種疾病的危害也正在逐漸地增加。尤其是由鰤諾卡氏菌引起的諾卡氏菌病，因為對該病實施有效地藥物治療患存在較多的困難，現在這種疾病對大口黑鱸養殖經濟效益的影響還是比較大的。

這篇小文章在介紹了大口黑鱸諾卡氏菌病的病原生物學特點、流行病學規律、病原細菌的致病機制和現有防控方法的基礎上，提出了難以有效治療這種疾病的對策。目的是幫助大口黑鱸的廣大養殖業者減少防治疾病工作種的盲目性，提高對大口黑鱸諾卡氏菌病的科學防控水平。

大口黑鱸諾卡氏菌病的

危害與防控方法

摘要：本文內容是簡要介紹了危害養殖大口黑鱸（

Micropterus salmoides

Nocardia seriolae

關鍵詞：大口黑鱸；鰤諾卡氏菌；諾卡氏菌病；抗微生物藥物；免疫預防

自從1983年大口黑鱸（

Micropterus salmoides

在我國水產養殖區域大口黑鱸養殖業的快速發展過程中，有一種在養殖魚類鰓、肝胰臟等內臟中出現白色結節的細菌性疾病（圖1），即為由鰤諾卡氏菌（

Nocardia seriolae

圖1 示患諾卡氏菌病的大口黑鱸鰓、肝胰臟中呈現的白色結節

大口黑鱸的諾卡氏菌病是一種慢性疾病、也是能影響到受感染大口黑鱸生理系統的疾病、致病性細菌寄生部位可出現肉芽腫（granuloma）癥狀，水產養殖業者將其俗稱結節病（sarcoidosis）。患病大口黑鱸體表常伴有出血、潰瘍和“蛀鰭”的癥狀（圖2）。

圖2 示患諾卡氏菌病的大口黑鱸體表出現出血、潰瘍和蛀鰭的癥狀

1. 病原菌及其生物學特性

鰤諾卡氏菌為革蘭氏陽性桿菌，有細長的菌絲，菌絲末端不膨大。色素小顆粒壓碎染色鏡檢，可見顆粒呈菊花狀。抗酸染色為弱陽性，在鹽酸酒精中較長時間可完全脫色，這可與結核桿菌相區別。諾卡氏菌屬為專性需氧菌。在普通培養基或沙氏瓊脂培養基中可緩慢生長，需5~7d可見菌落大小不等，表面有皺褶，顆粒狀；不同種類可產生不同色素。

諾卡氏菌屬的特點是在培養15h至4d內，菌絲體產生橫隔膜，分枝的菌絲體突然全部斷裂成長短近于一致的桿狀或球狀體或帶杈的桿狀體。

諾卡氏菌主要分布于土壤中，現已報道100多種。能引起養殖魚類諾卡氏菌病的致病菌主要有鰤諾卡氏菌、星形諾卡氏菌（

Nocardia asteroides

Nocardia salmonicida

Seriola dumerili

Stephanolepis cirrhifer

Thamnaconus modestus

Seriola quinqueradiata

Megalaspis cordyla

Paralichthys olivaceus

Larimichthys crocea

Trachinotus ovatus

Channa argus

諾卡氏菌感染養殖大口黑鱸的初期不易被養殖業者發現，體表無任何癥狀的患病個體，可能會存在內部組織器官嚴重感染的情況；同時，即使病情已經發展到很嚴重程度的個體，也不一定會導致大口黑鱸體表出現可見潰瘍等癥狀；而有些患病魚體與研究者們以往報道該病臨床癥狀存在很多差異，在有些患病大口黑鱸的肝臟、脾臟等內部器官病不存在肉眼可見的肉芽腫癥狀。在患病大口黑鱸呈現出腎臟膿樣囊腫，剖解后能見到大量混有血液的膿樣分泌物，從這種病灶組織中采樣后分離、純化到的分離菌株，大多可以鑒定并證實是感染了諾卡氏菌屬細菌的緣故。

2.諾卡氏菌對魚類的致病機制

諾卡氏菌感染養殖魚類后很少引起急性和暴發性死亡，可謂是一種慢性消耗性疾病。當養殖魚類發生諾卡氏菌病后，水產養殖業者采用常規治療水產養殖動物細菌性疾病的方法氏難以治愈的。雖然諾卡氏菌病已經成為大口黑鱸等養殖魚類的一種較為嚴重的疾病，但是，至今為止，該菌對養殖魚類的致病機制尚未完全研究明了。根據現有文獻報道，諾卡氏菌是利用自身相關毒力因子，通過細胞黏附、侵襲，并隱藏在肉芽腫中，利用免疫逃避（immune evasion）策略進行增殖，再通過調節細胞凋亡（apoptosis）和干擾趨化因子或細胞因子的活性，抑制感染魚類自身免疫系統的免疫防御反應，并抑制吞噬細胞（phagocyte）功能和抑制巨噬細胞（macrophage）殺菌作用，從而達到與感染對象“共存”的目的。

諾卡氏菌被巨噬細胞吞噬后得以存活，可能與其免疫逃逸機制和復雜又厚實的細胞壁有關；而存活下來的的諾卡氏菌可隨著巨噬細胞的遷移繼續侵染受感染魚類的各種器官，在受感染魚類體內不斷繁殖、侵染。受感染魚類為了抵抗諾卡氏菌的侵襲和擴散，在病灶周圍積累了大量的免疫細胞（immune cells）和其它細胞（如上皮細胞），形成肉芽腫組織（就是我們常見的白色結節）。由于在肉芽腫的中心也存在具有活性的諾卡氏菌，而肉芽腫形成給諾卡氏菌提供了天然保護屏障結構，抗微生物藥物或其它化學藥物的抑、殺菌作用會因此大幅度減弱；同時，肉芽腫還可以通過當做諾卡氏菌的庇護所，維持諾卡氏菌傳染力從而促進持久的傳染性感染。

簡而言之，諾卡氏菌就是一個可以靠偽裝、欺騙、逃避在感染的養殖魚體內存活下來，而且還能在受感染魚體內部游走，同時還能利用受感染魚類的免疫系統為其提供的“庇護所”而存活下來的一種致病性細菌。

3.養殖魚類諾卡氏菌病的防控對策

對養殖大口黑鱸可以采取如下預防與治療措施。

3.1預防諾卡氏菌病的措施

對大口黑鱸諾卡氏菌病流行病學調查結果證實，養殖水體水質問題是引起諾卡氏菌病流行的最關鍵因素。當養殖水體水質呈酸性（水質pH低），亞硝酸鹽濃度比較高的養殖池塘中，養殖大口黑鱸諾卡氏菌病的發病率呈現出明顯上升的趨勢，而且有效治療的難度也更大。在我國華南地區如珠三角地區，由于天氣多變、存在養殖水體溫差比較大以及溶氧量不穩定等養殖環境因素，比較容易引起養殖大口黑鱸體質下降，為諾卡氏菌的感染與傳播提供機會，更容易造成諾卡氏菌的感染。

因此，對養殖水體水質實施科學調節，降低或者避免養殖環境中理化因子對大口黑鱸造成的應激性刺激，對于預防養殖大口黑鱸諾卡氏菌病的發生與流行是十分重要的。

其次，在流行病學調查中還發現，即使同一水體中飼養的養殖魚類群體中，呈現營養不良的養殖大口黑鱸個體更容易感染諾卡氏菌，尤其是在養殖大口黑鱸進入產卵期前后，因為魚體體質下降也是容易感染諾卡氏菌導致該病多發的重要原因。

其三，日本的預防養殖魚類諾卡氏菌病的實踐證明，利用從患病五條鰤體內分離的鰤諾卡氏菌制備滅活菌苗，免疫接種養殖五條鰤后，可以有效地預防由鰤諾卡氏菌病感染養殖五條鰤而引起的疾病。我國目前還沒有能免疫預防鰤諾卡氏菌的魚用疫苗。不過，已經有研究結果證明，采用投喂免疫調節劑（immunomodulator）的方法，通過定期在大口黑鱸飼料中添加酵母免疫多糖，調節養殖大口黑鱸自身免疫系統的免疫防御功能，實現免疫預防養殖大口黑鱸諾卡氏菌病是有可能的。

3.2治療諾卡氏菌病的方法

參照人體醫學對結核分枝桿菌（

Mycobacterium tuberculosis

M.leprae

我國已經有研究這證明：采用農業農村部允許在水產養殖動物中使用的強力霉素（四環素類）、氟苯尼考（氯霉素類）和甲氧芐啶-磺胺甲惡唑（復方新諾明-水產磺胺類）對魚類諾卡氏菌病的藥物治療具有較好的療效。但是，通過最近幾年國內外相關研究結果來看，諾卡氏菌對抗微生物藥物容易產生耐藥性，隨著致病性細菌對水產用抗微生物獸藥耐藥性逐漸增強，藥物治療效果逐漸變差。

需要強調的是，選擇適宜的治療諾卡氏菌病的藥物，首先要從患病魚體內分離到致病菌株，然后針對分離菌株完成水產用抗微生物獸藥的敏感性實驗檢測；根據分離菌株對水產用抗微生物獸藥的敏感程度，選擇適宜的治療疾病的水產用抗微生物獸藥，最后指導水產養殖業者再治療疾病過程種做到精準用藥。

因為鰤諾卡氏菌屬于細胞內寄生菌，入侵到魚體內的致病菌會受到養殖魚類吞噬細胞的保護，進入患病魚體內的水產用抗微生物獸藥，也無法將寄生在吞噬細胞內的致病性細菌殺滅。因此，按照日本和美國人的藥物治療這類細胞內寄生菌引起疾病的方法，可以適當地延長投喂治療水產用獸藥的療程，直至養殖水體中不再出現有死亡患病魚體的現象為止。

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作者：華中農業大學陳昌福；武漢科研時代生物技術有限公司周鑫軍。

編輯：鄭燕云

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