【寫在前面】：本期推薦的是由中國長江三峽大學宜昌第二人民醫院、三峽大學國家中醫藥管理局中藥藥理三級實驗室、中國長江三峽大學醫學與健康科學學院等研究團隊合作近期發表于Journal of Ethnopharmacology(IF5.4）的一篇文章，揭示桂枝茯苓丸對子宮腺肌病線粒體吞噬的調節作用。

【期刊簡介】

【題目及作者信息】

Regulation on mitophagy in adenomyosis by Guizhi Fuling Wan

民族藥理學相關性

桂枝茯苓丸（GZFLW）是一種源自《金匱要略》的經典草藥制劑，已被廣泛用于治療疼痛相關疾病。雖然其對以嚴重痛經為特征的子宮腺肌病（AM）的治療效果有據可查，但其潛在的藥理學機制仍然難以捉摸。新的證據表明，子宮內膜組織中的缺氧線粒體損傷是AM的病理標志，其中通過PINK1/Parkin信號通路進行的線粒體吞噬調節在線粒體質量控制中起著關鍵作用。盡管某些植物藥物在缺氧條件下顯示出調節線粒體吞噬的特性，但GZFLW在AM發病機制中對這一過程的具體調節作用值得系統研究。

目的

通過體內和體外綜合方法闡明GZFLW在AM中的自噬調節機制。

方法

建立了異基因垂體移植誘導AM小鼠模型。藥效學評估包括熱板試驗和血清癌癥抗原125（CA125）定量，同時監測血液尿素氮（BUN）和丙氨酸氨基轉移酶（ALT）水平以進行肝腎毒性篩查。組織病理學特征采用蘇木精-伊紅（H&E）染色和透射電子顯微鏡（TEM）進行超微結構分析。通過蛋白質印跡法測定PINK1/Parkin通路成分（PINK1、Parkin、OPTIN、NDP52、P62）的蛋白質表達。從臨床AM標本中分離出的原代子宮內膜基質細胞（ESCs）通過經孔遷移/侵襲試驗進行了功能評估，并輔以線粒體膜電位（MMP）和活性氧（ROS）的流式細胞術定量。分子對接模擬評估了GZFLW生物活性成分與PINK1/Parkin蛋白之間的配體-受體相互作用。本研究方案經中國長江三峽大學醫學倫理委員會批準（編號2022CA002）。

結果

組織病理學驗證證實AM模型建立成功。ELISA顯示AM小鼠的CA125水平與對照組相比顯著升高（P<0.05），GZFLW治療組的CA125水平顯著降低（GET:P<0.05，GZFLW-L:P<0.01）。ALT/BUN水平沒有出現組間差異，表明沒有肝腎毒性。GZFLW治療減輕了建模后的痛閾降低（與對照組相比P<0.05）。透射電鏡分析顯示AM子宮內膜的線粒體病理，包括結構變形、線粒體數量減少和自噬體積累，所有這些都通過GZFLW-L干預得到改善。Western blot顯示AM組PINK1（P<0.01）、Parkin、OPTIN和NDP52（P<0.05）上調，隨后GZFLW-L給藥后下調（P<0.05）。在體外，AM ESCs表現出MMP去極化（P<0.05），GZFLW治療逆轉了MMP去極化，同時抑制了遷移/侵襲能力（P<0.01，P<0.05）、ROS減少（P<0.05）和PINK1/Parkin通路激活減弱。分子對接證實了GZFLW植物成分與PINK1/Parkin靶標之間的強結合親和力（結合能<-5.0 kcal/mol）。

結論

這項研究表明，GZFLW通過靶向調節PINK1/Parkin介導的自噬軸對AM發揮治療作用，支持其作為AM管理線粒體靶向治療策略的潛力。

圖文摘要

【前言】

子宮腺肌病（AM）是一種常見的婦科疾病，其特征是子宮內膜樣組織（包括腺體和基質）異常浸潤到子宮肌層中。臨床上，約90%被診斷為AM的女性出現月經過多、痛經和慢性盆腔疼痛等癥狀。此外，AM已被確定為約10%不孕病例的促成因素，突顯了其對生殖健康的重大影響。AM的發病機制與子宮內膜-子宮肌層界面（EMI）的復雜微環境密切相關，EMI在疾病進展中起著關鍵作用。盡管AM發展的確切機制尚不完全清楚，但EMI內的缺氧已被認為是其發病機制的關鍵觸發因素。最近的研究集中在AM中缺氧誘導的線粒體損傷和修復機制上，揭示了線粒體功能障礙可能導致疾病的進展。值得注意的是，PTEN誘導的推定激酶1（PINK1）介導的有絲分裂吞噬在缺氧條件下被激活，與增強細胞增殖和侵襲能力有關。我們最近的研究結果進一步表明，AM中PINK1介導的線粒體吞噬作用升高會導致線粒體損傷，這可能會導致在這種情況下觀察到的異常侵襲行為。

在中藥制劑中，桂枝茯苓丸（GZFLW）已被廣泛用于治療與“血瘀”相關的疼痛，這是一種被認為與AM發病機制密切相關的中醫證候。實驗證據表明，針對“血瘀”的中醫療法可以改善微循環，緩解慢性缺氧狀況。盡管GZFLW已被證明能有效抑制異位子宮內膜細胞的活性，但其對AM治療作用的確切分子機制仍知之甚少。

【結果部分】

1.GZFLW對AM小鼠的治療效果。

2.異位子宮內膜超微結構的變化。

3.GZFLW抑制AM小鼠線粒體自噬相關蛋白的表達。

4.GZFLW細胞活力。

5.GZFLW對AM ESCs遷移和侵襲的抑制作用。

6.GZFLW抑制了AM ESCs中與有絲分裂相關的蛋白質的表達。

7.GZFLW對AM ESCs中MMP的影響。

8.GZFLW對AM ESCs中ROS水平的影響。

9.GZFLW對AM ESCs線粒體自噬水平的影響。

10.分子對接的視覺結果。

【結論與討論】

研究表明，GZFLW通過PINK1/Parkin信號通路促進有絲分裂，在緩解AM方面具有巨大潛力。GZFLW治療可顯著降低CA125水平并緩解痛覺過敏。關鍵的線粒體吞噬相關蛋白，包括PINK1、Parkin、OPTIN、P62和NDP52，被下調，表明線粒體動力學受到調節。此外，GZFLW增強MMP，同時降低AM ESCs中的ROS水平。

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