師姐

誰又把離心機轉冒煙了？修理工程師已經把我們實驗室拉黑了！

昨晚熬夜提外泌體來著，用超速離心法通過不同轉速逐步去除雜質，不多運行幾次，純度怎么保證啊？這不又到了一批血液樣本，我準備和之前的細胞上清一起離，這樣總能減少離心機壓力了吧。

師妹

師姐

你這是危險操作啊！啥樣本都一股腦超離提純，得率能好嗎？

啊？得率低不是樣本的問題么，超離法還能有錯？

師妹

師姐

超離法沒錯，但不同的樣本特性千差萬別，選對合適的提純方法比努力更重要～ 文末附了 提純方法選擇思維導圖 ，你可以先看看。

那么如何快速精準選擇適合自己的外泌體提純方法？宇玫博根據不同樣本個性化定制試劑盒，操作簡便，結果穩定可靠，血液、尿液、細胞上清甚至是植物等，統統不在話下。即使是沒有離心機的小伙伴也能輕松 get 高純度外泌體。點擊下方圖片，免費申請試用～

聚乙二醇 PEG 沉淀法搭配 EPF 純化柱試劑盒

陰離子交換層析法試劑盒（無需離心機）

以下視頻詳細解答了外泌體提取純化過程中，不同樣本的特性及各自合適的提純方法，包你提升外泌體純度及得率~

常見的外泌體提純技術

1. 傳統超速離心技術

作為早期文獻提到的標準，超速離心法是科研人最先接觸到的，也是大多數的選擇，但是往往超離得率非常低（15%左右），很難拿到結果；對于高成本樣本諸如細胞培養上清，提純得率低會間接導致成本上升；而且超離的除菌能力非常雞肋，很多情況下超離后的樣本依然會導致細胞污染；最后，使用過程中諸如管子爆裂，設備排隊，長時間操作，轉子損壞維修時間長等問題也是很多實驗室面臨的常規隱患。

2. 經典 PEG 沉淀法

作為比較經典的提取方法，PEG 沉淀法幾乎兼容所有樣本，例如細胞上清、血液、組織、尿液、乳液、體液等等，得率較高（35～40%），操作簡便-全程不到兩個小時，性價比高，但混雜蛋白干擾多，對于做常規檢測和 RNA 測序來說，需要結合 EPF 柱除菌和游離的核酸以及大的囊泡等，而宇玫博試劑盒將沉淀法和 EPF 柱進行結合，提供更省時省力的解決手段。

● 2024 年 6 月發表在 Molecular cancer 上的一篇文章【1】就使用了宇玫博外泌體提取純化試劑盒（UR52121））進行膽囊癌細胞外泌體提取，結果符合各檢測指標，發現一種新穎且有廣泛應用價值的膽囊癌血管生成生物標志物，為未來的膽囊炎治療提供更多參考思路。

● 無獨有偶，同一個試劑盒被使用進行大腸桿菌的膜外囊泡的提取，助力客戶帕金森病研究【2】。該研究揭示了風險基因，如富亮氨酸重復蛋白激酶 2（LRRK2）和環境因素互作觸動神經元內 α-突觸核蛋白（α-syn）啟動帕金森的機制，為后續帕金森的治療開辟新途徑。

心動不如行動，趕快點擊下方圖片，申請試用宇玫博 PEG 沉淀法外泌體提取試劑盒~

3. 尺寸排阻-SEC 組合法

對于蛋白組學來講，實驗往往需要結合尺寸排阻-SEC 法提純外泌體，幫助排除雜蛋白干擾，檢測相對低豐度的蛋白。

而且，尺寸排阻-SEC 法組合操作后外泌體純度高、生物活性好，整個純化過程控制在 30 分鐘內。ExoPura? Basic 外泌體純化柱試劑盒（UR52180）適用于澄清度高的非復雜生物樣本（如細胞上清、牛奶澄清液等）中外泌體囊泡的分離和純化，且可重復使用。但 SEC 法對于雜蛋白去除率高達 94%，所以該實驗對樣本量和初始的蛋白濃度有要求，也就是說，需要準備較多的樣本量。感興趣的話，趕快點擊下圖申請試用吧～

4. 陰離子交換層析法

沒有高速離心機的實驗室，可以選擇陰離子交換層析法（UR52172）解決外泌體提純，上樣到獲得外泌體僅需 1 小時；高度適配于細胞培養上清液、尿液等非粘稠性樣本，無剪切力，保留外泌體的完整性和生物活性；層析法純度更高，回收率 30%，粒徑均一且重復性好。不過，如果后續外泌體濃度偏低，可考慮結合超濾管做濃縮。還在猶豫什么，手快的科研人已經享受上「無離心煩惱」的提取方式啦，點擊下方圖片申請試用 ~

對于細胞上清樣本而言，前期使用不同類型的外泌體培養基，對后期的提純效果也有不同影響，具體見表 1。

表 1 各類培養基優缺點總結表

在細胞培養源頭把雜蛋白種類控制好，采用化學成分限定培養基，能從根本上使外泌體純化變簡單，直接采用沉淀法 + EPF 柱，即可獲取比較高純度的外泌體，減少提取純化鏈路，減少操作過程的外泌體損失。外泌體專用無血清培養基（U51102）適用于腫瘤細胞和 T 細胞等，且不含生長因子，細胞培養過程中無需添加血清即可達到完全培養基的培養狀態，有利于外泌體的收獲。

● 空軍軍醫醫科大學西京醫院的教授團隊在 Journal of neuroinflammation 發表研究【3】聯合使用 Umibio 去外泌體胎牛血清（UR50202）進行胰腺腺泡細胞的培養實驗，在排除外源顆粒干擾下保證了細胞的正常生長及外泌體的正常分泌，為接下來的外泌體提取純化實驗提供了高質量的細胞上清。

●更有文章【4】直接集齊三類宇玫博王牌產品（外泌體專用培養基-UR51102；外泌體提取純化試劑盒-UR52121；外泌體標記用的外泌體紅色熒光標記染料（PKH26-UR52302 & 外泌體綠色熒光標記染料（PKH67）-UR52303），助力福建醫科大學附屬協和醫院檢驗科曹穎平教授團隊在 Cellular & Molecular Biology Letters 發表相關研究，為臨床解決高毒力肺炎克雷伯菌相關的膿毒癥所致急性肺損傷提供新的靶點和理論依據。

宇玫博還研制了外泌體專用間充質干細胞培養基，適用于 MSC 細胞的無血清、化學成分限定的培養基，專門用于該類細胞外泌體的制備與生產。而且細胞培養過程中無需添加血清或血小板裂解物，很大程度減少外源顆粒的干擾，促進 MSC 細胞分泌外泌體。點擊下圖一鍵試用~

宇玫博試劑盒針對性處理多種樣本，一鍵解鎖外泌體提純外掛。更有百篇文獻助力，結果安全可靠，如果你還在猶豫選擇什么提純方法，建議保存下方的思維導圖，包你速成外泌體提純專家！

內容策劃：王丹琦

內容審核：吳軍

題圖來源：自己做的

參考文獻

[1] Exosomal long non-coding RNA TRPM2-AS promotes angiogenesis in gallbladder cancer through interacting with PABPC1 to activate NOTCH1 signaling pathway. Mol Cancer. 2024 Mar 27;23(1):65.

[2] Escherichia coli triggers α-synuclein pathology in the LRRK2 transgenic mouse model of PD. Gut Microbes. 2023 Dec;15(2):2276296.

[3] Optimized rAAV8 targeting acinar KLF4 ameliorates fibrosis in chronic pancreatitis via exosomes-enriched let-7s suppressing pancreatic stellate cells activation. Mol Ther. 2024 Aug 7;32(8):2624-2640.

[4] Exosomal miR-155-5p drives widespread macrophage M1 polarization in hypervirulent Klebsiella pneumoniae-induced acute lung injury via the MSK1/p38-MAPK axis, Cell Mol Biol Lett. 2023 Nov 13;28(1):92. doi: 10.1186/s11658-023-00505-1.