近日，東南大學附屬中大醫院醫學檢驗科主任吳國球教授團隊，在美國化學會分析化學領域權威期刊 Analytical chemistry（《分析化學》）（中科院一區Top期刊）發表了題為“Dual-OR Logic-Gated Lateral Flow Strip Assay Based on Colorimetric-Fluorescence Dual Indication for Screening of HPV16/18 in Multiple Scenarios（基于比色-熒光雙指示的雙OR邏輯門控側流層析試紙條用于多場景下HPV16/18篩查）”的研究成果，該研究將三分支催化發夾組裝介導的信號放大技術與基于簡單OR邏輯門的信號輸出相結合，開發了一種基于雙OR邏輯門的三線側流條帶檢測系統，成功實現了對HPV 16/18的高靈敏度鑒定，為探索邏輯門在臨床檢測中的應用提供了思路。東南大學附屬中大醫院醫學檢驗科吳國球教授為第一通訊作者，東南大學醫學院博士研究生王繼瑋為論文第一作者。

宮頸癌是一種惡性疾病，在欠發達地區由于人類乳頭瘤病毒（HPV）疫苗接種不普及以及缺乏完善的篩查計劃，宮頸癌的發病率和死亡率不斷上升。篩查系統的改進主要涉及 HPV 感染的檢測，包括血清學檢測、混合捕獲技術、qPCR 技術和 Cervista 檢測方法等。其中，qPCR 是最常用的 HPV 感染檢測方法，但諸多因素限制了其在篩查中的廣泛應用。此外，HPV篩查過程中的自我采樣可為參與篩查項目的婦女提供更多隱私保護，有利于篩查的廣泛開展。因此，開發一種簡便且可在現場拆卸的HPV 快速檢測系統既有意義又有必要。

圖 1：（A）用于檢測臨床樣本的三線側流條帶操作流程；（B）目標觸發報告器組裝的示意圖；（C）三線側流條帶結構圖及其 OR 邏輯門讀取模式圖。

鑒于HPV病毒的保守序列通常具有復雜的高級結構，靶序列很可能被掩蓋；以及臨床樣本中的大量夾雜物對探針觸發概率的影響。我們將OR邏輯門的概念運用到檢測的方法學中，通過OR 邏輯門的多靶位識別-合并信號輸出來提高陽性樣本的檢測率。與RT-PCR方法相比，該方法無需核酸提取等前處理，反應速度快，樣品制備簡單，通量潛力大，對設備的依賴性低，有利于受試者的自我檢測和基層醫療單位的大規模篩查。其靈敏度和特異性均超過 95%，檢測時間縮短至 30 分鐘。

圖 2.熒光側向流試紙條的檢測性能評估。(A，D）不同濃度的 HPV18 mRNA或 HPV16 mRNA在熒光側向流試紙中的熒光可見度；（B，E）對應的熒光強度；（C、F）熒光側向流試紙檢測 HPV18 mRNA或 HPV16 mRNA的熒光強度與目標濃度對數之間的線性關系；（G）熒光側向流試紙的特異性評估；（H、I）熒光側向流試紙的可重復性評估；（J）基于 “OR ”邏輯門的 TCHA-FLFIA 輸出可視化。a ~ e 點的輸入真值：blank、（0,0,0,0）、（1,1,0 ,0）、（0,0,1,1）、（1,1,1,1）。

該方法是一套適應不同使用場景的側向流檢測系統，它補充了現有的HPV快速篩查方法，為宮頸癌預防提供了更多可能。（編輯王倩 校對劉敏 編審程守勤）