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近期飼料“帶毒”爭議再度引發行業關注。在珠三角地區,有鱖魚養殖從業者送檢的多批次飼料樣品中被檢出病毒CT值呈陽性,部分養殖戶因此質疑飼料或是鱖魚養殖高失敗率的主因。此類爭論并非首次出現:2022年,某大型飼料企業的蝦料曾被檢出白斑病毒陽性,同期江蘇如東亦有人通過PCR技術在蝦料中檢測到蝦腸肝胞蟲DNA片段,并由此與企業產生糾紛。記者認為,業內應保持理性,切勿跟風。
即便飼料病毒檢測陽性,它也不具備感染能力
膨化鱖魚料的生產經歷高溫高壓的過程,即便存在致病菌、病毒等微生物,也均已被滅活而失去活性,不具備感染能力。
其生產過程主要如下:
第一是核心滅菌環節:飼料原料在調質階段,100℃以上蒸汽注入調制3-5分鐘+膨化工序的110-120℃高溫+20-40大氣壓高壓+持續15-60秒,構成了一個遠超病毒滅活閾值的極端物理環境。病毒最基本的生命物質(蛋白質和核酸)在此條件下發生不可逆變性、降解。
第二是干燥二次保障:后續的干燥過程(90-100℃持續12-20分鐘)提供了額外的熱處理冗余,進一步確保任何理論上的僥幸殘留被清除。
第三是封閉式后處理:冷卻、噴涂、包裝均在可控的潔凈環境中進行,有效隔絕了環境中病原的再次污染。
病毒由蛋白質與核酸組成,其核酸由蛋白質外殼所包裹。通俗地講,把它比作一顆雞蛋,它有完整的蛋殼、蛋清、蛋黃,如果把條件控制好,它甚至能孵出小雞來。而經過加熱后,蛋清蛋黃發生變性成為固體,煮熟的雞蛋再也不可能孵出小雞了。
然而,飼料中是否真的可能存在病毒片段呢?旺海集團將9個不同廠家的鱖魚飼料樣品,送到6家不同的檢測機構檢測病毒,有兩家機構均未檢出病毒;一家機構僅7號樣品檢測ISKNV的CT值41.8(理論上應判為陰性,國家標準:CT值>40應判斷為陰性),其余機構則檢測到3份或以上的樣品ISKNV的CT值35以內,個別檢測的ISKNV的CT值甚至達到16(中強陽性)。
這一復雜的檢測結果,該相信哪個?
病毒檢測行業缺乏規范,檢測結果不具備說服力
隨著養殖技術的進步,不少養殖戶也逐漸提高了病害檢測的意識,我們都知道在拿苗前都要去做一下檢測確保其本身不帶毒,從而減少養殖風險。然而相信不少養戶也發現這樣的一個問題,同樣一批苗送去不同的檢測點檢出結果可謂天差地別,有的檢測點檢出陰性,有的卻又檢出陽性,甚至強陽性。
新冠核酸檢測造假還記得吧。新冠疫情期間據各媒體報道,全國已經查到250多家核酸檢測公司有問題。他們的主要問題是:故意造假,陰陽顛倒,把核酸檢測陰性改為陽性。其次,那些公司的取樣和測試人員沒有經過專業培訓,不懂核酸檢測技術和規范。第三,公司沒有嚴格的規章制度,管理混亂。第四,公司的核酸檢測人員工作馬虎,粗枝大葉,樣本測試錯誤、數據記錄錯誤屢見不鮮。
魚病檢測更有甚者!這一亂象的背后,在水產養殖業也愈演愈烈。如無資質的檢測機構、不懂核酸檢測技術和規范的操作人員、各種花樣的檢測試劑盒和檢測儀器、不規范的檢測實驗室與檢測流程等等。一些唯利是圖的相關從業者,出具“假陽”、“假陰”結果誤導養殖戶。如假陽性結果,誤導養殖戶盲目排塘或過度用藥;假陰性結果,掩蓋疫病風險,如個別檢測點為維護合作苗場利益,故意出具陰性報告,導致養殖戶購入帶病苗種。其中有多少黑幕這里就不多說了,參考新冠核酸造假即可。
PCR實驗室建設標準是什么,你是否達標?
標準的PCR實驗室分為四個區域且壓差控制。分別包括試劑準備區、樣品處理區、核酸擴增區、產物分析區。整個區域有一個整體緩沖走廊。每個獨立的實驗區都有一個緩沖區。①試劑準備區用于貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴增反應混合液的準備,以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準備;②樣品處理區用于臨床標本的保存,核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和所測定核酸的合成;③核酸擴增區用于DNA合成、DNA擴增及檢測;④產物分析區用于擴增片段的進一步分析測定,如雜交、酶切電泳、變性高效液相分析、測序等;⑤緩沖區用于阻絕空氣交換。
每個區域都通過氣壓進行調節,以防止在整個PCR實驗過程中試劑和樣本受到氣溶膠污染,并減少擴增產物對人員和環境的污染。
通常可根據實驗方法的不同和需要進行區域合并。比如使用實時熒光PCR儀時,擴增區與產物分析區可合并;全自動一體化儀器可合并樣本制備至產物分析區。
實驗室設計不規范,氣溶膠污染問題將十分嚴重。氣溶膠污染通俗的講就是很小的固體或者液體顆粒(像灰塵、煙塵、霧滴)飄在空氣里。這些顆粒非常小,小到只有0.01微米,大的也不超過10微米。它們能在空氣中停留很長時間,少則幾個小時。
在PCR實驗室中,氣溶膠污染主要發生在樣本制備和PCR擴增過程,實驗室通風不足或氣流紊亂,將使含核酸顆粒長期懸浮并擴散,單個氣溶膠顆??蓴y帶高達48,000個核酸拷貝,微量污染即可引發假陽性。且氣溶膠污染是漸進過程,未及時清潔的儀器表面(如移液器內壁、臺面)會持續釋放污染顆粒,導致實驗室環境整體惡化。筆者當初也從事過病毒檢測相關工作,充分體會到了氣溶膠污染的“魔力”。
飼料經過高溫膨化,在這種情況下卻認為飼料檢出陽性且是導致鱖魚養殖高失敗率的主因,難道不是違背常識?科學的檢測方法不應成為飼料企業市場競爭的手段,且業內應保持理性切勿跟風。另外,鱖魚飼料“帶毒”風波實為行業規范缺失的縮影。破解困局需雙管齊下:短期需建立檢測機構認證與結果復核機制;長期應推動PCR實驗室強制規范及全鏈條追溯體系,從源頭遏止“核酸造假”亂象。唯有強化監管與科學認知,方能避免養殖戶在“假陽性恐慌”與“假陰性風險”中反復迷失。
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作者:王權
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