作為一項檢測特定蛋白質的有效方法,操作步驟繁瑣、費用相對經濟的蛋白質印跡法(Western blotting,WB) 為科學史的發展立下汗馬功勞。以往不少人的慣有做法是裁剪凝膠或 WB 圖像,裁剪過程會去掉圖像中無關的部分,只呈現感興趣的蛋白質。
然而,凝膠和 WB 圖像的裁剪可能會出現問題,負面評價也隨之而來,WB 不可避免地成了造假重災區。
PLOS ONE曾對 2017 年到 2019 年倫理組處理的所有圖像問題進行統計,發現 WB 圖像問題位居首位,引得人們密切關注。
2019 年 7 月 1 日起,
PLOS ONE
PLOS Biology雜志均要求作者提供 WB 的原始數據,必須提供原始的,未剪切和最小化調整的圖像,否則將對其實施拒稿操作。
來源:網絡
如此強有力的舉措勢必將讓更多的「妄圖蒙混過關者」望而卻步!
做好 WB 善后工作,認真閱讀投稿指南
因此,做 WB 的小伙伴們一定要認真閱讀各類雜志對于 WB 圖片的投稿要求,做到有的放矢。在進行 WB 實驗時,將每一個步驟都做到科學合理,留存好完整和原始的凝膠和圖像,避免因為格式上的問題引起編輯誤會,從而導致稿件被拒或需返工補充實驗。
學術期刊多如過江之鯽,如果不知道怎么界定 WB 圖片要求,跟著 CNS 期刊要求準沒有錯。
Nature雜志明確要求要提交未經裁剪圖像,內參和目的蛋白在同一張膜上,盡量不跑平行膠,以保證實驗數據的準確性。
Nature
Cell雜志直接提出需要提供實驗各個環節的原始數據和圖像,如果未按時提交,文章可能推遲發表或存在撤稿風險。
Cell
Diabetes雜志明確要求提交所有原始、未裁剪、未編輯的圖像文件,包括計劃在文章最終版中發表的所有 gels、Western Blots、顯微照片等。
2024 年,著名的臨床醫學期刊Journal of Clinical Investigation(J CI)及旗下子刊JCI Insight要求,含剪裁 Blot/Gel 圖像需提交包含所有裁剪印跡和凝膠未編輯圖像的文件,還需要標注「圖 [X] 的完整未編輯 Blot/Gel」 及對應通道。
此外,學霸君整理了部分期刊對于 WB 圖片的明確要求,供大家參考。
來源:自己做的
學術道路千萬條,科研誠信第一條
作為科研工作者,應心懷敬畏,嚴格地維護學術羽毛,按照 WB 實驗要求去完成每一個細節,一定要遵守標準規則,做到原始數據的保留,數據作圖的規范,將其作用發揮到最大,而不要被其反噬。
大家有什么 WB 經驗分享嗎,踩過哪些 WB 實驗和投稿的坑呢?一起來評論區和學霸君討論吧!
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